生态科学
生態科學
생태과학
ECOLOGIC SCIENCE
2006年
1期
25-27,31
,共4页
廖婉琴%梁旭方%王琳%韩博平
廖婉琴%樑旭方%王琳%韓博平
료완금%량욱방%왕림%한박평
微囊藻毒素去毒酶%微囊藻毒素%转基因模型%调控元件%生物去毒器
微囊藻毒素去毒酶%微囊藻毒素%轉基因模型%調控元件%生物去毒器
미낭조독소거독매%미낭조독소%전기인모형%조공원건%생물거독기
根据已克隆的鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)微囊藻毒素去毒酶cDNA全序列设计特异引物,利用PCR方法获得鲢鱼微囊藻毒素去毒酶基因编码区,将该编码区与绿色荧光蛋白连接,分别构建融合表达载体pEGFP-N1-sGST和双顺反子表达载体pIRES2-EGFP-sGST.利用脂质体转染法将融合表达载体pEGFP-N1-sGST转染Hela细胞,60 h后检测到绿色荧光基因表达;通过显微注射,将双顺反子表达载体pIRES2-EGFP-sGST注入斑马鱼(Danio rerio)受精卵,获得了转鲢鱼微囊藻毒素去毒酶基因斑马鱼,从而构建了微囊藻毒素去毒酶转基因模型.上述2种转基因模型的成功构建为进一步研究鲢鱼、鳙鱼(Aristichthys nobilis)、罗非鱼(Oreochromis nilotica)等淡水鱼类微囊藻毒素去毒酶基因调控元件、去毒分子机理及研发转基因鲢鱼、鳙鱼、罗非鱼等微囊藻毒素高效生物去毒器奠定了基础.
根據已剋隆的鰱魚(Hypophthalmichthys molitrix)微囊藻毒素去毒酶cDNA全序列設計特異引物,利用PCR方法穫得鰱魚微囊藻毒素去毒酶基因編碼區,將該編碼區與綠色熒光蛋白連接,分彆構建融閤錶達載體pEGFP-N1-sGST和雙順反子錶達載體pIRES2-EGFP-sGST.利用脂質體轉染法將融閤錶達載體pEGFP-N1-sGST轉染Hela細胞,60 h後檢測到綠色熒光基因錶達;通過顯微註射,將雙順反子錶達載體pIRES2-EGFP-sGST註入斑馬魚(Danio rerio)受精卵,穫得瞭轉鰱魚微囊藻毒素去毒酶基因斑馬魚,從而構建瞭微囊藻毒素去毒酶轉基因模型.上述2種轉基因模型的成功構建為進一步研究鰱魚、鳙魚(Aristichthys nobilis)、囉非魚(Oreochromis nilotica)等淡水魚類微囊藻毒素去毒酶基因調控元件、去毒分子機理及研髮轉基因鰱魚、鳙魚、囉非魚等微囊藻毒素高效生物去毒器奠定瞭基礎.
근거이극륭적련어(Hypophthalmichthys molitrix)미낭조독소거독매cDNA전서렬설계특이인물,이용PCR방법획득련어미낭조독소거독매기인편마구,장해편마구여록색형광단백련접,분별구건융합표체재체pEGFP-N1-sGST화쌍순반자표체재체pIRES2-EGFP-sGST.이용지질체전염법장융합표체재체pEGFP-N1-sGST전염Hela세포,60 h후검측도록색형광기인표체;통과현미주사,장쌍순반자표체재체pIRES2-EGFP-sGST주입반마어(Danio rerio)수정란,획득료전련어미낭조독소거독매기인반마어,종이구건료미낭조독소거독매전기인모형.상술2충전기인모형적성공구건위진일보연구련어、용어(Aristichthys nobilis)、라비어(Oreochromis nilotica)등담수어류미낭조독소거독매기인조공원건、거독분자궤리급연발전기인련어、용어、라비어등미낭조독소고효생물거독기전정료기출.
