CAJ | 학술논문

在以前的研究中,本实验室采用酵母双杂交技术,从人KT3 T淋巴细胞cDNA文库中筛选到一个与CD2胞内区结合的新的蛋白分子,称为v-fos转化效因子(v-fos transformation effector,Fte-1).本研究进一步分析鉴定了Fte-1与CD2相互作用的分子机制和Fte-1的生物学功能.应用研究生物大分子相互作用的生物传感器分析了CD2胞内区与Fte-1结合特性和亲和力,表明二者确为特异性结合,其解离常数KD值为10-7 mol/L; 分子缺失突变和体外磷酸化实验结果表明,Fte-1可被蛋白激酶C(PKC)磷酸化,其磷酸化位点为Ser238; 基因表达研究显示,在Jurkat T淋巴细胞白血病细胞中Fte-1呈簇集性分布; CD2单克隆抗体T11刺激Jurkat T淋巴细胞后,Fte-1这种簇集性分布特征消失,而趋向细胞膜,并与CD2共定位于细胞膜区域; Fte-1的PKC磷酸化位点Ser238突变为Gly238后,其与CD2分子的共定位能力丧失,表明Fte-1的Ser238的PKC磷酸化对Fte-1和CD2在T淋巴细胞内的结合起关键作用; 使用Fte-1干扰RNA技术抑制Fte-1在Jurkat T淋巴细胞中的表达,可抑制佛波酯(PMA)和离子霉素(ionomycin)引起的Jurkat T淋巴细胞激活后凋亡,提示Fte-1参与了CD2对T淋巴细胞凋亡的调节.上述结果进一步确证Fte-1是CD2胞内区的特异结合蛋白,并可能参与了CD2介导的细胞凋亡信号传递.
재이전적연구중,본실험실채용효모쌍잡교기술,종인KT3 T림파세포cDNA문고중사선도일개여CD2포내구결합적신적단백분자,칭위v-fos전화효인자(v-fos transformation effector,Fte-1).본연구진일보분석감정료Fte-1여CD2상호작용적분자궤제화Fte-1적생물학공능.응용연구생물대분자상호작용적생물전감기분석료CD2포내구여Fte-1결합특성화친화력,표명이자학위특이성결합,기해리상수KD치위10-7 mol/L; 분자결실돌변화체외린산화실험결과표명,Fte-1가피단백격매C(PKC)린산화,기린산화위점위Ser238; 기인표체연구현시,재Jurkat T림파세포백혈병세포중Fte-1정족집성분포; CD2단극륭항체T11자격Jurkat T림파세포후,Fte-1저충족집성분포특정소실,이추향세포막,병여CD2공정위우세포막구역; Fte-1적PKC린산화위점Ser238돌변위Gly238후,기여CD2분자적공정위능력상실,표명Fte-1적Ser238적PKC린산화대Fte-1화CD2재T림파세포내적결합기관건작용; 사용Fte-1간우RNA기술억제Fte-1재Jurkat T림파세포중적표체,가억제불파지(PMA)화리자매소(ionomycin)인기적Jurkat T림파세포격활후조망,제시Fte-1삼여료CD2대T림파세포조망적조절.상술결과진일보학증Fte-1시CD2포내구적특이결합단백,병가능삼여료CD2개도적세포조망신호전체.