华中医学杂志
華中醫學雜誌
화중의학잡지
CENTRAL CHINA MEDICAL JOURNAL
2008年
3期
188-190
,共3页
马彦彬%戴五星%陈智浩%高红
馬彥彬%戴五星%陳智浩%高紅
마언빈%대오성%진지호%고홍
热休克蛋白65%结核分枝杆菌%Ag85A基因%共表达载体
熱休剋蛋白65%結覈分枝桿菌%Ag85A基因%共錶達載體
열휴극단백65%결핵분지간균%Ag85A기인%공표체재체
目的 构建人结核杆菌热休克蛋白65(Hsp65)与Ag85A基因的共表达载体pIRES-Hsp65-Ag85A, 并检测其在体外的表达.方法 利用聚合酶链反应(PCR)法及基因重组技术, 以人结核杆菌基因组DNA为模板, 扩增获得Hsp65与Ag85A的全长基因,并将其构建到真核表达质粒pIRES中获得共表达质粒pIRES-Hsp65-Ag85A.将该质粒转染Hela细胞,通过RT-PCR的方法检测目的基因的表达.结果 经过测序证实重组质粒构建成功, 该质粒在体外转染Hela细胞后可表达Hsp65与Ag85A两者的mRNA.结论 成功构建了共表达质粒pIRES-Hsp65-Ag85A, 该质粒能在人子宫颈癌细胞中表达.
目的 構建人結覈桿菌熱休剋蛋白65(Hsp65)與Ag85A基因的共錶達載體pIRES-Hsp65-Ag85A, 併檢測其在體外的錶達.方法 利用聚閤酶鏈反應(PCR)法及基因重組技術, 以人結覈桿菌基因組DNA為模闆, 擴增穫得Hsp65與Ag85A的全長基因,併將其構建到真覈錶達質粒pIRES中穫得共錶達質粒pIRES-Hsp65-Ag85A.將該質粒轉染Hela細胞,通過RT-PCR的方法檢測目的基因的錶達.結果 經過測序證實重組質粒構建成功, 該質粒在體外轉染Hela細胞後可錶達Hsp65與Ag85A兩者的mRNA.結論 成功構建瞭共錶達質粒pIRES-Hsp65-Ag85A, 該質粒能在人子宮頸癌細胞中錶達.
목적 구건인결핵간균열휴극단백65(Hsp65)여Ag85A기인적공표체재체pIRES-Hsp65-Ag85A, 병검측기재체외적표체.방법 이용취합매련반응(PCR)법급기인중조기술, 이인결핵간균기인조DNA위모판, 확증획득Hsp65여Ag85A적전장기인,병장기구건도진핵표체질립pIRES중획득공표체질립pIRES-Hsp65-Ag85A.장해질립전염Hela세포,통과RT-PCR적방법검측목적기인적표체.결과 경과측서증실중조질립구건성공, 해질립재체외전염Hela세포후가표체Hsp65여Ag85A량자적mRNA.결론 성공구건료공표체질립pIRES-Hsp65-Ag85A, 해질립능재인자궁경암세포중표체.
