吉林农业大学学报
吉林農業大學學報
길임농업대학학보
JOURNAL OF JILIN AGRICUL TURAL UNIVERSITY
2009年
2期
229-232
,共4页
孙娜%林雁春%曹海涛%马红霞
孫娜%林雁春%曹海濤%馬紅霞
손나%림안춘%조해도%마홍하
沙门氏菌%家蝇幼虫%cDNA文库%重组率%文库滴度
沙門氏菌%傢蠅幼蟲%cDNA文庫%重組率%文庫滴度
사문씨균%가승유충%cDNA문고%중조솔%문고적도
采用沙门氏菌以针刺法诱导家蝇三日龄幼虫,提取诱导后培养24 h的家蝇幼虫总RNA,进一步分离、纯化其mRNA,运用SMART技术构建家蝇幼虫cDNA文库.结果表明:原始文库的滴度为1.55 × 106 pfu/mL,原始文库重组宰为99.5%,文库扩增后滴度达1.27 × 10 pfu/mL.从扩增文库随机挑取10个噬菌斑克隆进行PCR扩增鉴定,结果显示所选的lO个噬菌体克隆均合有重组的cDNA,插入片段大小为400～1 500 bp.
採用沙門氏菌以針刺法誘導傢蠅三日齡幼蟲,提取誘導後培養24 h的傢蠅幼蟲總RNA,進一步分離、純化其mRNA,運用SMART技術構建傢蠅幼蟲cDNA文庫.結果錶明:原始文庫的滴度為1.55 × 106 pfu/mL,原始文庫重組宰為99.5%,文庫擴增後滴度達1.27 × 10 pfu/mL.從擴增文庫隨機挑取10箇噬菌斑剋隆進行PCR擴增鑒定,結果顯示所選的lO箇噬菌體剋隆均閤有重組的cDNA,插入片段大小為400～1 500 bp.
채용사문씨균이침자법유도가승삼일령유충,제취유도후배양24 h적가승유충총RNA,진일보분리、순화기mRNA,운용SMART기술구건가승유충cDNA문고.결과표명:원시문고적적도위1.55 × 106 pfu/mL,원시문고중조재위99.5%,문고확증후적도체1.27 × 10 pfu/mL.종확증문고수궤도취10개서균반극륭진행PCR확증감정,결과현시소선적lO개서균체극륭균합유중조적cDNA,삽입편단대소위400～1 500 bp.
