CAJ | 학술논문

本研究目的是建立孕妇外周血胎儿ABO血型基因分型技术,用于ABO血型不合引起的新生儿溶血病的产前诊断.根据ABO血型基因DNA全序列和mRNA序列设计4对引物,选择20例健康供者血浆,提取血浆中DNA进行扩增,探索最佳的血浆DNA提取及PCR扩增条件,初步建立单人ABO血型基因分型技术.将O型血浆DNA与A型或B型血浆DNA按1:1、2:1、4:1、8:1、10:1、20:1、40:1、100:1进行混合,模拟孕妇外周血胎儿与孕妇自身ABO基因混合状态,建立混合ABO血型基因分型技术.选取14例孕30周以上的孕妇外周血标本,进行胎儿ABO血型基因型鉴定,并对孕妇进行追踪,尽量获取胎儿出生以后的外周血标本进行ABO血型鉴定,以评价孕妇外周血胎儿ABO血型基因分型技术的灵敏度与准确性.结果表明:单人血浆进行准确血型鉴定的最少模板DNA量约为0.625 ng,500μ血浆提取的DNA量即可达到PCR扩增要求;当混合血浆中O型DNA所占比例≤10时,可以准确检测出非O基因的存在;14名O型孕妇外周血标本中9例标本扩增出非O型基因,5例未扩增出非O基因;通过血清学方法对5例胎儿出生后外周血进行ABO血型鉴定,其中A型3例,B型1例,O型1例,与其基因分型结果一致,符合率100%.结论:本研究建立的孕妇外周血胎儿ABO血型基因提取、分型技术,可以对妊娠中晚期胎儿ABO血型基因型进行准确鉴定,从而为新生儿溶血病的产前诊断与预防提供指导意见.
본연구목적시건립잉부외주혈태인ABO혈형기인분형기술,용우ABO혈형불합인기적신생인용혈병적산전진단.근거ABO혈형기인DNA전서렬화mRNA서렬설계4대인물,선택20례건강공자혈장,제취혈장중DNA진행확증,탐색최가적혈장DNA제취급PCR확증조건,초보건립단인ABO혈형기인분형기술.장O형혈장DNA여A형혹B형혈장DNA안1:1、2:1、4:1、8:1、10:1、20:1、40:1、100:1진행혼합,모의잉부외주혈태인여잉부자신ABO기인혼합상태,건립혼합ABO혈형기인분형기술.선취14례잉30주이상적잉부외주혈표본,진행태인ABO혈형기인형감정,병대잉부진행추종,진량획취태인출생이후적외주혈표본진행ABO혈형감정,이평개잉부외주혈태인ABO혈형기인분형기술적령민도여준학성.결과표명:단인혈장진행준학혈형감정적최소모판DNA량약위0.625 ng,500μ혈장제취적DNA량즉가체도PCR확증요구;당혼합혈장중O형DNA소점비례≤10시,가이준학검측출비O기인적존재;14명O형잉부외주혈표본중9례표본확증출비O형기인,5례미확증출비O기인;통과혈청학방법대5례태인출생후외주혈진행ABO혈형감정,기중A형3례,B형1례,O형1례,여기기인분형결과일치,부합솔100%.결론:본연구건립적잉부외주혈태인ABO혈형기인제취、분형기술,가이대임신중만기태인ABO혈형기인형진행준학감정,종이위신생인용혈병적산전진단여예방제공지도의견.