生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2011年
1期
1-5
,共5页
马祖兴%高宁%于芳%林宇翔%绳纪坡%胡宝成
馬祖興%高寧%于芳%林宇翔%繩紀坡%鬍寶成
마조흥%고저%우방%림우상%승기파%호보성
丝氨酸或半胱氨酸蛋白酶抑制剂B2%表达%纯化%多克隆抗体
絲氨痠或半胱氨痠蛋白酶抑製劑B2%錶達%純化%多剋隆抗體
사안산혹반광안산단백매억제제B2%표체%순화%다극륭항체
目的:原核表达、纯化大鼠丝氨酸或半胱氨酸蛋白酶抑制剂B2(SERPINB2),并制备其多克隆抗体.方法:设计扩增大鼠Serpinb2全长基因的特异引物,通过PCR扩增出该基因片段,测序正确后插入含GST基因的原核表达载体pGEX-KG中,以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;用纯化的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,用ELISA测定抗体的效价,Western印迹鉴定抗体的特异性.结果:原核表达了大鼠Serpinb2全长基因,纯化了SERPINB2蛋白,并获得了抗SERPINB2的多克隆抗体,抗体效价达到1:25 600,Western印迹结果显示该抗体能特异识别原核及真核细胞表达的SERPINB2.结论:SERPINB2能够诱导小鼠产生具有较高效价和特异性的多克隆抗体,为进一步研究SERPINB2的功能奠定了基础.
目的:原覈錶達、純化大鼠絲氨痠或半胱氨痠蛋白酶抑製劑B2(SERPINB2),併製備其多剋隆抗體.方法:設計擴增大鼠Serpinb2全長基因的特異引物,通過PCR擴增齣該基因片段,測序正確後插入含GST基因的原覈錶達載體pGEX-KG中,以IPTG誘導錶達,併經穀胱甘肽瓊脂糖珠純化融閤蛋白;用純化的蛋白免疫小鼠製備多剋隆抗體,用ELISA測定抗體的效價,Western印跡鑒定抗體的特異性.結果:原覈錶達瞭大鼠Serpinb2全長基因,純化瞭SERPINB2蛋白,併穫得瞭抗SERPINB2的多剋隆抗體,抗體效價達到1:25 600,Western印跡結果顯示該抗體能特異識彆原覈及真覈細胞錶達的SERPINB2.結論:SERPINB2能夠誘導小鼠產生具有較高效價和特異性的多剋隆抗體,為進一步研究SERPINB2的功能奠定瞭基礎.
목적:원핵표체、순화대서사안산혹반광안산단백매억제제B2(SERPINB2),병제비기다극륭항체.방법:설계확증대서Serpinb2전장기인적특이인물,통과PCR확증출해기인편단,측서정학후삽입함GST기인적원핵표체재체pGEX-KG중,이IPTG유도표체,병경곡광감태경지당주순화융합단백;용순화적단백면역소서제비다극륭항체,용ELISA측정항체적효개,Western인적감정항체적특이성.결과:원핵표체료대서Serpinb2전장기인,순화료SERPINB2단백,병획득료항SERPINB2적다극륭항체,항체효개체도1:25 600,Western인적결과현시해항체능특이식별원핵급진핵세포표체적SERPINB2.결론:SERPINB2능구유도소서산생구유교고효개화특이성적다극륭항체,위진일보연구SERPINB2적공능전정료기출.
