基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2011年
7期
809-813
,共5页
魏华生%尤列·皮尔曼%维克多·科罗索夫%周向东
魏華生%尤列·皮爾曼%維剋多·科囉索伕%週嚮東
위화생%우렬·피이만%유극다·과라색부%주향동
Elafin%核因子-κB%小泛素样修饰蛋白-1%类泛素化%黏蛋白5AC
Elafin%覈因子-κB%小汎素樣脩飾蛋白-1%類汎素化%黏蛋白5AC
Elafin%핵인자-κB%소범소양수식단백-1%류범소화%점단백5AC
目的 探讨Elafin在胞质内对表皮生长因子(EGF)诱导的黏蛋白(MUC)5AC生成的影响及其作用机制.方法 体外培养人支气管上皮细胞系16HBE,将已构建好的pEGFP-N1-Elafin载体通过LipofectamineTM2000转染到16HBE细胞中,以转染空质粒载体的16HBE细胞作为对照,均给予外源性EGF作为刺激物共同孵育.以RT-PCR和ELISA分别检测细胞内黏蛋白(MUC)5AC mRNA水平和MUC5AC含量.间接免疫荧光细胞化学法结合激光共聚焦显微镜检测细胞核中核因子(NF)-κB的活性.免疫共沉淀法结合Western blot检测SUMO-1-p-IκBα含量.结果 转染重组质粒的细胞中MUCSAC mRNA水平、MUCSAC的含量(0.36 ±0.09)以及NF-κB的活性显著低于转染空载体的对照组细胞(MUC5AC的含量0.55±0.07)(P<0.01),而SUMO-1-p-IκBα的含量则显著高于后者(P<0.01).结论 Elafin能够通过促进p-IκBα的类泛素化阻止NF-κB的活化,从而下调MUC5AC的生成.
目的 探討Elafin在胞質內對錶皮生長因子(EGF)誘導的黏蛋白(MUC)5AC生成的影響及其作用機製.方法 體外培養人支氣管上皮細胞繫16HBE,將已構建好的pEGFP-N1-Elafin載體通過LipofectamineTM2000轉染到16HBE細胞中,以轉染空質粒載體的16HBE細胞作為對照,均給予外源性EGF作為刺激物共同孵育.以RT-PCR和ELISA分彆檢測細胞內黏蛋白(MUC)5AC mRNA水平和MUC5AC含量.間接免疫熒光細胞化學法結閤激光共聚焦顯微鏡檢測細胞覈中覈因子(NF)-κB的活性.免疫共沉澱法結閤Western blot檢測SUMO-1-p-IκBα含量.結果 轉染重組質粒的細胞中MUCSAC mRNA水平、MUCSAC的含量(0.36 ±0.09)以及NF-κB的活性顯著低于轉染空載體的對照組細胞(MUC5AC的含量0.55±0.07)(P<0.01),而SUMO-1-p-IκBα的含量則顯著高于後者(P<0.01).結論 Elafin能夠通過促進p-IκBα的類汎素化阻止NF-κB的活化,從而下調MUC5AC的生成.
목적 탐토Elafin재포질내대표피생장인자(EGF)유도적점단백(MUC)5AC생성적영향급기작용궤제.방법 체외배양인지기관상피세포계16HBE,장이구건호적pEGFP-N1-Elafin재체통과LipofectamineTM2000전염도16HBE세포중,이전염공질립재체적16HBE세포작위대조,균급여외원성EGF작위자격물공동부육.이RT-PCR화ELISA분별검측세포내점단백(MUC)5AC mRNA수평화MUC5AC함량.간접면역형광세포화학법결합격광공취초현미경검측세포핵중핵인자(NF)-κB적활성.면역공침정법결합Western blot검측SUMO-1-p-IκBα함량.결과 전염중조질립적세포중MUCSAC mRNA수평、MUCSAC적함량(0.36 ±0.09)이급NF-κB적활성현저저우전염공재체적대조조세포(MUC5AC적함량0.55±0.07)(P<0.01),이SUMO-1-p-IκBα적함량칙현저고우후자(P<0.01).결론 Elafin능구통과촉진p-IκBα적류범소화조지NF-κB적활화,종이하조MUC5AC적생성.
