猪流感病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
저류감병독실시형광정량RT-PCR검측방법적건립
Real-Time Quantitative RT-PCR Assay for Detection of Swine Influenza Virus
  • 万方数据
    中国畜牧兽医 중국축목수의
    CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
    2012年 6期 181-184 ,共4页

    张太翔%凌宗帅%岳志芹%徐彪%梁成珠%刘文鹏%张焕海%张艺兵

    장태상%릉종수%악지근%서표%량성주%류문붕%장환해%장예병

    猪流感病毒%实时荧光定量PCR%TaqMan探针 豬流感病毒%實時熒光定量PCR%TaqMan探針
    저류감병독%실시형광정량PCR%TaqMan탐침
    本研究选取猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的NP基因序列设计引物和探针,建立了检测SIV的TaqMan实时荧光定量PCR方法.以梯度稀释的含有SIV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度.2.0×108至2.0× 102拷贝/μL 7个数量级的范围内定量PCR有“S”型扩增曲线,检测灵敏度为20个拷贝/μL.根据病毒拷贝数与Ct值的关系绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸都没有扩增反应.本研究建立的实时定量PCR方法,灵敏度高、特异性好,可以进行定量分析,在猪流感的快速检测上具有重要意义.
    본연구선취저류감병독(swine influenza virus,SIV)적NP기인서렬설계인물화탐침,건립료검측SIV적TaqMan실시형광정량PCR방법.이제도희석적함유SIV목적확증편단적질립작위표준품,진행정량PCR반응이학정검측령민도.2.0×108지2.0× 102고패/μL 7개수량급적범위내정량PCR유“S”형확증곡선,검측령민도위20개고패/μL.근거병독고패수여Ct치적관계회제료표준곡선.해방법구유특이성,대저온병독、위광견병병독、구제역병독화저번식여호흡종합정병독핵산도몰유확증반응.본연구건립적실시정량PCR방법,령민도고、특이성호,가이진행정량분석,재저류감적쾌속검측상구유중요의의.
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