CAJ | 학술논문

目的分离纯化日本血吸虫成虫可溶性抗原(soluble adult worm antigens,SAWA)各个组分,并分别鉴定其诱导小鼠脾淋巴细胞表达γ-干扰素(IFN-γ)的能力.方法常规制备血吸虫SAWA,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)层析法分离、收集并透析纯化各抗原组分,SDS-PAGE检测分析其含量及相对分子质量(Mr).常规制备感染42 d小鼠脾淋巴细胞悬液,设立PBS阴性对照组及各组分抗原实验组,分别刺激体外培养的感染小鼠脾淋巴细胞,诱生IFN-γ,用双抗夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组IFN-γ水平,筛选出能诱导IFN-γ高表达的抗原组分.结果获得20种Mr不同且含量较高的SAWA组分抗原,Mr(×103)分别为22、23、24、28、40、45、56、62、64、65、68、70、71、74、78、91、95、102、102、105,其电泳图谱均显示为清晰的单一带.各组分抗原均能不同程度地诱导IFN-γ表达,其中Mr(×103)为22、24、45、62、64、65的组分抗原诱导IFN-γ的表达量较高,尤其是62×103组分抗原诱导表达IFN-γ水平显著高于其他实验组(P＜0.01).结论电泳层析法能很好地将日本血吸虫成虫可溶性抗原分成多个组分:62×103组分抗原具有诱导小鼠脾淋巴细胞高表达IFN-γ的能力,推测它可能是一个很强的Th1型淋巴细胞活性诱导分子.
목적 분리순화일본혈흡충성충가용성항원(soluble adult worm antigens,SAWA)각개조분,병분별감정기유도소서비림파세포표체γ-간우소(IFN-γ)적능력.방법 상규제비혈흡충SAWA,경십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)층석법분리、수집병투석순화각항원조분,SDS-PAGE검측분석기함량급상대분자질량(Mr).상규제비감염42 d소서비림파세포현액,설립PBS음성대조조급각조분항원실험조,분별자격체외배양적감염소서비림파세포,유생IFN-γ,용쌍항협심매련면역흡부실험(ELISA)검측각조IFN-γ수평,사선출능유도IFN-γ고표체적항원조분.결과 획득20충Mr불동차함량교고적SAWA조분항원,Mr(×103)분별위22、23、24、28、40、45、56、62、64、65、68、70、71、74、78、91、95、102、102、105,기전영도보균현시위청석적단일대.각조분항원균능불동정도지유도IFN-γ표체,기중Mr(×103)위22、24、45、62、64、65적조분항원유도IFN-γ적표체량교고,우기시62×103조분항원유도표체IFN-γ수평현저고우기타실험조(P＜0.01).결론 전영층석법능흔호지장일본혈흡충성충가용성항원분성다개조분:62×103조분항원구유유도소서비림파세포고표체IFN-γ적능력,추측타가능시일개흔강적Th1형림파세포활성유도분자.