细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
1期
65-68
,共4页
张思河%杨向民%邢金良%陈志南
張思河%楊嚮民%邢金良%陳誌南
장사하%양향민%형금량%진지남
HAb18G/CD147%免疫方案%DNA-cell booster%抗体滴度%Ig亚类
HAb18G/CD147%免疫方案%DNA-cell booster%抗體滴度%Ig亞類
HAb18G/CD147%면역방안%DNA-cell booster%항체적도%Ig아류
目的: 制备针对肝癌相关抗原HAb18G/CD147胞外区不同表位的抗血清, 比较不同免疫方案的免疫效果.方法: 以原核表达的GST-HAb18GEF融合蛋白、重组真核表达质粒pcDNA3/HAb18G及HCC细胞为免疫原, 分别采用蛋白常规免疫、 DNA肌肉免疫及pcDNA3/HAb18G-HCC booster(DNA-cell booster)免疫接种BALB/c小鼠.采用间接ELISA和细胞ELISA, 同时测定免疫血清中抗变性和天然HAb18GEF IgG抗体的滴度和Ig亚类.用Western blot检测各免疫方案制备的抗血清, 与变性HAb18GEF抗原结合的特异性.用免疫荧光法验证DNA-cell booster免疫接种法制备的抗血清, 与细胞膜上天然HAb18G抗原的结合特异性.结果: 以GST-HAb18GEF常规免疫后, 可诱导高滴度的IgG1抗体产生, 但针对的多为HAb18GEF的变性或线性表位; 以pcDNA3/HAb18G肌肉免疫后, 可诱导针对其天然表位的IgG2a抗体产生, 但滴度较低; 以DNA-cell booster免疫后, 可诱导中等滴度、针对其天然表位的IgG2a和IgG1抗体产生.结论: 不同免疫方案可诱导针对HAb18GEF不同表位、不同滴度的多克隆抗血清, 为淘筛针对其不同表位的多样性抗体奠定了基础.
目的: 製備針對肝癌相關抗原HAb18G/CD147胞外區不同錶位的抗血清, 比較不同免疫方案的免疫效果.方法: 以原覈錶達的GST-HAb18GEF融閤蛋白、重組真覈錶達質粒pcDNA3/HAb18G及HCC細胞為免疫原, 分彆採用蛋白常規免疫、 DNA肌肉免疫及pcDNA3/HAb18G-HCC booster(DNA-cell booster)免疫接種BALB/c小鼠.採用間接ELISA和細胞ELISA, 同時測定免疫血清中抗變性和天然HAb18GEF IgG抗體的滴度和Ig亞類.用Western blot檢測各免疫方案製備的抗血清, 與變性HAb18GEF抗原結閤的特異性.用免疫熒光法驗證DNA-cell booster免疫接種法製備的抗血清, 與細胞膜上天然HAb18G抗原的結閤特異性.結果: 以GST-HAb18GEF常規免疫後, 可誘導高滴度的IgG1抗體產生, 但針對的多為HAb18GEF的變性或線性錶位; 以pcDNA3/HAb18G肌肉免疫後, 可誘導針對其天然錶位的IgG2a抗體產生, 但滴度較低; 以DNA-cell booster免疫後, 可誘導中等滴度、針對其天然錶位的IgG2a和IgG1抗體產生.結論: 不同免疫方案可誘導針對HAb18GEF不同錶位、不同滴度的多剋隆抗血清, 為淘篩針對其不同錶位的多樣性抗體奠定瞭基礎.
목적: 제비침대간암상관항원HAb18G/CD147포외구불동표위적항혈청, 비교불동면역방안적면역효과.방법: 이원핵표체적GST-HAb18GEF융합단백、중조진핵표체질립pcDNA3/HAb18G급HCC세포위면역원, 분별채용단백상규면역、 DNA기육면역급pcDNA3/HAb18G-HCC booster(DNA-cell booster)면역접충BALB/c소서.채용간접ELISA화세포ELISA, 동시측정면역혈청중항변성화천연HAb18GEF IgG항체적적도화Ig아류.용Western blot검측각면역방안제비적항혈청, 여변성HAb18GEF항원결합적특이성.용면역형광법험증DNA-cell booster면역접충법제비적항혈청, 여세포막상천연HAb18G항원적결합특이성.결과: 이GST-HAb18GEF상규면역후, 가유도고적도적IgG1항체산생, 단침대적다위HAb18GEF적변성혹선성표위; 이pcDNA3/HAb18G기육면역후, 가유도침대기천연표위적IgG2a항체산생, 단적도교저; 이DNA-cell booster면역후, 가유도중등적도、침대기천연표위적IgG2a화IgG1항체산생.결론: 불동면역방안가유도침대HAb18GEF불동표위、불동적도적다극륭항혈청, 위도사침대기불동표위적다양성항체전정료기출.
