世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2005年
9期
1089-1093
,共5页
李超%林菊生%陈孝平%易继林%陶璐薇
李超%林菊生%陳孝平%易繼林%陶璐薇
리초%림국생%진효평%역계림%도로미
肝癌%α-L-岩藻糖苷酶%离子交换层析法
肝癌%α-L-巖藻糖苷酶%離子交換層析法
간암%α-L-암조당감매%리자교환층석법
目的:提取人肝癌组织的α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fuCosidase,AFU)经纯化和鉴定后,为制备特异性多克隆抗体提供纯化的抗原.方法:运用超滤和离子交换层析等方法提取、纯化人肝癌组织的AFU,并经SDS-PAGE检测蛋白纯度及相对分子质量.根据荧光底物4-甲基微型酮-α-L-岩藻糖苷(4-methylumbelliferyl-α-L-fucopyranoside,4-MU-fuCoside)和纯化的蛋白在特定条件下反应生成产物4-甲基微型酮(4-methylumbelliferone,4-MU)的量来检测酶活性.检测蛋白浓度用Bradford方法.结果:提纯并纯化的AFU经SDS-PAGE鉴定有一个亚单位Mr 55 000.经过一系列纯化步骤后,肝癌组织的AFU可得到74倍纯化,15%收率.结论:肝癌组织的AFU可通过离子交换层析法提取和纯化并可用于制备抗体.
目的:提取人肝癌組織的α-L-巖藻糖苷酶(α-L-fuCosidase,AFU)經純化和鑒定後,為製備特異性多剋隆抗體提供純化的抗原.方法:運用超濾和離子交換層析等方法提取、純化人肝癌組織的AFU,併經SDS-PAGE檢測蛋白純度及相對分子質量.根據熒光底物4-甲基微型酮-α-L-巖藻糖苷(4-methylumbelliferyl-α-L-fucopyranoside,4-MU-fuCoside)和純化的蛋白在特定條件下反應生成產物4-甲基微型酮(4-methylumbelliferone,4-MU)的量來檢測酶活性.檢測蛋白濃度用Bradford方法.結果:提純併純化的AFU經SDS-PAGE鑒定有一箇亞單位Mr 55 000.經過一繫列純化步驟後,肝癌組織的AFU可得到74倍純化,15%收率.結論:肝癌組織的AFU可通過離子交換層析法提取和純化併可用于製備抗體.
목적:제취인간암조직적α-L-암조당감매(α-L-fuCosidase,AFU)경순화화감정후,위제비특이성다극륭항체제공순화적항원.방법:운용초려화리자교환층석등방법제취、순화인간암조직적AFU,병경SDS-PAGE검측단백순도급상대분자질량.근거형광저물4-갑기미형동-α-L-암조당감(4-methylumbelliferyl-α-L-fucopyranoside,4-MU-fuCoside)화순화적단백재특정조건하반응생성산물4-갑기미형동(4-methylumbelliferone,4-MU)적량래검측매활성.검측단백농도용Bradford방법.결과:제순병순화적AFU경SDS-PAGE감정유일개아단위Mr 55 000.경과일계렬순화보취후,간암조직적AFU가득도74배순화,15%수솔.결론:간암조직적AFU가통과리자교환층석법제취화순화병가용우제비항체.
