非洲马瘟病毒VP7基因的克隆与表达
비주마온병독VP7기인적극륭여표체
Cloning and Expression of VP7 Gene of African Horse Sickness Virus
  • 万方数据
    中国农学通报 중국농학통보
    CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
    2006年 10期 49-53 ,共5页

    曾昭文%花群义%段纲%周晓黎%董俊%杨云庆%尹尚莲%项勋%常华

    증소문%화군의%단강%주효려%동준%양운경%윤상련%항훈%상화

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    为获得非洲马瘟病毒VP7蛋白,以用于制备AHS血清学诊断试剂并为AHS新型疫苗的构建奠定基础,笔者采用原核表达系统表达VP7蛋白.在GeneBank中查找非洲马瘟病毒VP7基因序列,人工合成VP7基因,将VP7基因片段克隆插入pBAD/Thio-TOPO表达载体,将重组质粒转入大肠杆菌TOP10.经测序鉴定,筛选获得VP7基因正向插入、有正确读码框的阳性克隆,经L-Arabinose诱导表达VP7融合蛋白抗原.SDS-PAGE分析表明以终浓度为0.2%的L-阿拉伯糖进行诱导,4h后表达可达到高峰,融合蛋白质量约54.72kDa.Western blotting检测和间接ELISA表明诱导表达的融合蛋白能与非洲马瘟病毒VP7单克隆抗体发生特异性反应,说明蛋白有特异的免疫学活性.
    위획득비주마온병독VP7단백,이용우제비AHS혈청학진단시제병위AHS신형역묘적구건전정기출,필자채용원핵표체계통표체VP7단백.재GeneBank중사조비주마온병독VP7기인서렬,인공합성VP7기인,장VP7기인편단극륭삽입pBAD/Thio-TOPO표체재체,장중조질립전입대장간균TOP10.경측서감정,사선획득VP7기인정향삽입、유정학독마광적양성극륭,경L-Arabinose유도표체VP7융합단백항원.SDS-PAGE분석표명이종농도위0.2%적L-아랍백당진행유도,4h후표체가체도고봉,융합단백질량약54.72kDa.Western blotting검측화간접ELISA표명유도표체적융합단백능여비주마온병독VP7단극륭항체발생특이성반응,설명단백유특이적면역학활성.
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