西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2007年
1期
10-13
,共4页
刘朝晖%杨宇%庄鹏辉%许杰华%马延兵%胡海涛
劉朝暉%楊宇%莊鵬輝%許傑華%馬延兵%鬍海濤
류조휘%양우%장붕휘%허걸화%마연병%호해도
SK-N-SH神经母细胞瘤细胞%增强型绿色荧光蛋白%反转录病毒载体
SK-N-SH神經母細胞瘤細胞%增彊型綠色熒光蛋白%反轉錄病毒載體
SK-N-SH신경모세포류세포%증강형록색형광단백%반전록병독재체
目的 构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率.方法 使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP).将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH3T3荧光表达细胞的数量来确定病毒的浓度;使用RV载体感染SK-N-SH细胞,通过流式细胞学荧光检测明确RV在SK-N-SH细胞的感染效率.结果 成功构建了基因转移载体RV/EGFP,确定重组病毒的浓度为8.3×106病毒颗粒/mL.在SK-N-SH细胞RV/EGFP稳定转染并有效表达.在SK-N-SH细胞EGFP的荧光表达显示RV的转移并且表达的效率达到3O%以上.结论 SK-N-SH细胞能被RV病毒载体有效感染,在转基因细胞株外源基因的表达长期稳定并且显示RV病毒载体具有良好的基因转移效率.
目的 構建攜帶報告基因增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)的反轉錄病毒載體,併且探討病毒載體對SK-N-SH神經母細胞瘤細胞株的感染效率.方法 使用基因重組技術構建攜帶EGFP基因的反轉錄病毒載體(RV/EGFP).將稀釋的RV病毒液感染NIH3T3細胞,計數NIH3T3熒光錶達細胞的數量來確定病毒的濃度;使用RV載體感染SK-N-SH細胞,通過流式細胞學熒光檢測明確RV在SK-N-SH細胞的感染效率.結果 成功構建瞭基因轉移載體RV/EGFP,確定重組病毒的濃度為8.3×106病毒顆粒/mL.在SK-N-SH細胞RV/EGFP穩定轉染併有效錶達.在SK-N-SH細胞EGFP的熒光錶達顯示RV的轉移併且錶達的效率達到3O%以上.結論 SK-N-SH細胞能被RV病毒載體有效感染,在轉基因細胞株外源基因的錶達長期穩定併且顯示RV病毒載體具有良好的基因轉移效率.
목적 구건휴대보고기인증강형록색형광단백(EGFP)적반전록병독재체,병차탐토병독재체대SK-N-SH신경모세포류세포주적감염효솔.방법 사용기인중조기술구건휴대EGFP기인적반전록병독재체(RV/EGFP).장희석적RV병독액감염NIH3T3세포,계수NIH3T3형광표체세포적수량래학정병독적농도;사용RV재체감염SK-N-SH세포,통과류식세포학형광검측명학RV재SK-N-SH세포적감염효솔.결과 성공구건료기인전이재체RV/EGFP,학정중조병독적농도위8.3×106병독과립/mL.재SK-N-SH세포RV/EGFP은정전염병유효표체.재SK-N-SH세포EGFP적형광표체현시RV적전이병차표체적효솔체도3O%이상.결론 SK-N-SH세포능피RV병독재체유효감염,재전기인세포주외원기인적표체장기은정병차현시RV병독재체구유량호적기인전이효솔.
