细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
12期
1136-1139
,共4页
乙肝表面抗原突变体%毕赤酵母%免疫反应性
乙肝錶麵抗原突變體%畢赤酵母%免疫反應性
을간표면항원돌변체%필적효모%면역반응성
目的:构建和表达乙肝表面抗原(HBsAg)突变体用于HBsAg抗原性的深入研究.方法:利用定点突变技术构建HBsAg突变体,然后转化毕赤酵母GS115,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot分析,利用AxSYM HBsAg V2(Abbott)酶免试剂盒检测重组表面抗原的活性.结果:通过序列分析确定突变体构建成功,SDS-PAGE显示突变体能在毕赤酵母中有效表达,在Western blot试验中HBsAg突变体被特异性多克隆抗体识别,相对分子质量(Mr)约为38 000,AxSYM试剂盒检测结果表明HBsAg突变体具有一定生物活性.结论:利用毕赤酵母表达系统高效表达出具有一定免疫反应性的HBsAg突变体,对于目前市售试剂盒的质量控制和临床应用有较高的实档用价值.
目的:構建和錶達乙肝錶麵抗原(HBsAg)突變體用于HBsAg抗原性的深入研究.方法:利用定點突變技術構建HBsAg突變體,然後轉化畢赤酵母GS115,菌落PCR、高濃度Zeocin抗性篩選鑒定轉化子,錶達產物經SDS-PAGE分析和Western blot分析,利用AxSYM HBsAg V2(Abbott)酶免試劑盒檢測重組錶麵抗原的活性.結果:通過序列分析確定突變體構建成功,SDS-PAGE顯示突變體能在畢赤酵母中有效錶達,在Western blot試驗中HBsAg突變體被特異性多剋隆抗體識彆,相對分子質量(Mr)約為38 000,AxSYM試劑盒檢測結果錶明HBsAg突變體具有一定生物活性.結論:利用畢赤酵母錶達繫統高效錶達齣具有一定免疫反應性的HBsAg突變體,對于目前市售試劑盒的質量控製和臨床應用有較高的實檔用價值.
목적:구건화표체을간표면항원(HBsAg)돌변체용우HBsAg항원성적심입연구.방법:이용정점돌변기술구건HBsAg돌변체,연후전화필적효모GS115,균락PCR、고농도Zeocin항성사선감정전화자,표체산물경SDS-PAGE분석화Western blot분석,이용AxSYM HBsAg V2(Abbott)매면시제합검측중조표면항원적활성.결과:통과서렬분석학정돌변체구건성공,SDS-PAGE현시돌변체능재필적효모중유효표체,재Western blot시험중HBsAg돌변체피특이성다극륭항체식별,상대분자질량(Mr)약위38 000,AxSYM시제합검측결과표명HBsAg돌변체구유일정생물활성.결론:이용필적효모표체계통고효표체출구유일정면역반응성적HBsAg돌변체,대우목전시수시제합적질량공제화림상응용유교고적실당용개치.
