CAJ | 학술논문

目的:观察马尾松花粉多糖硫酸酯(SPPM60)对人肝癌细胞株HepG2的诱导分化作用, 并对其机制进行初步探讨.方法:MTT法检测HepG2细胞增殖活力; 倒置显微镜、HE染色及透射电镜观察细胞形态;流式细胞技术检测细胞周期; 荧光分光光度计检测细胞内钙离子浓度的变化; 免疫细胞化学方法检测甲胎蛋白的表达, 溴甲酚绿法测定白蛋白含量; 重氮反应比色法测定γ-谷氨酰转肽酶活力, 比色法测定碱性磷酸酶活力, 考马斯亮蓝法测定总蛋白含量.结果:经SPPM60处理后, HepG2细胞的增殖受到抑制; 细胞形态趋于正常; 与对照组相比, SPPM60组G0/G1期细胞数增加(76.97%±0.91% vs 64.62%±0.18%, P<0.05), S期细胞数减少(17.21%±0.71% vs 24.26%±0.15%,P<0.05), G2/M细胞数减少(5.82%±0.20% vs11.13%±0.34%, P<0.01); [Ca2+]i降低; 甲胎蛋白表达降低, 白蛋白分泌量上升(6.77±0.33 mg/106细胞vs 4.87±0.30 mg/106细胞,P<0.05), γ-谷氨酰转肽酶与碱性磷酸酶活力降低(16.3±0.7 U/g vs 22.3±1.2 U/g; 223.3±15.7 U/g vs 311.1±13.4 U/g P<0.05或0.01), 胎盘型碱性磷酸酶的比例降低(46.4%±1.5% vs62.5%±2.3%, P<0.05). PPM60组细胞没有明显变化.结论:硫酸酯化赋予了SPPM60抑制HepG2细胞的活性, 其作用机理可能是降低细胞内钙离子浓度, 阻滞细胞周期于G0/G1期, 诱导HepG2细胞分化逆转其恶性.
목적:관찰마미송화분다당류산지(SPPM60)대인간암세포주HepG2적유도분화작용, 병대기궤제진행초보탐토.방법:MTT법검측HepG2세포증식활력; 도치현미경、HE염색급투사전경관찰세포형태;류식세포기술검측세포주기; 형광분광광도계검측세포내개리자농도적변화; 면역세포화학방법검측갑태단백적표체, 추갑분록법측정백단백함량; 중담반응비색법측정γ-곡안선전태매활력, 비색법측정감성린산매활력, 고마사량람법측정총단백함량.결과:경SPPM60처리후, HepG2세포적증식수도억제; 세포형태추우정상; 여대조조상비, SPPM60조G0/G1기세포수증가(76.97%±0.91% vs 64.62%±0.18%, P<0.05), S기세포수감소(17.21%±0.71% vs 24.26%±0.15%,P<0.05), G2/M세포수감소(5.82%±0.20% vs11.13%±0.34%, P<0.01); [Ca2+]i강저; 갑태단백표체강저, 백단백분비량상승(6.77±0.33 mg/106세포vs 4.87±0.30 mg/106세포,P<0.05), γ-곡안선전태매여감성린산매활력강저(16.3±0.7 U/g vs 22.3±1.2 U/g; 223.3±15.7 U/g vs 311.1±13.4 U/g P<0.05혹0.01), 태반형감성린산매적비례강저(46.4%±1.5% vs62.5%±2.3%, P<0.05). PPM60조세포몰유명현변화.결론:류산지화부여료SPPM60억제HepG2세포적활성, 기작용궤리가능시강저세포내개리자농도, 조체세포주기우G0/G1기, 유도HepG2세포분화역전기악성.