小鼠GITR真核表达载体的构建及表达
소서GITR진핵표체재체적구건급표체
Construction and expression of eukaryotic expression vectors of mouse GITR
  • 万方数据
    江苏大学学报(医学版) 강소대학학보(의학판)
    ACADEMIC JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY(MEDICINE)
    2011年 4期 329-332 ,共4页

    沈培%郑东%刘艳%田洁%赵银霞%刘青玲%朱晨露%马洁%苏兆亮%马斌%许化溪%王胜军

    침배%정동%류염%전길%조은하%류청령%주신로%마길%소조량%마빈%허화계%왕성군

    mGITR%真核表达%转染%COS-7%细胞 mGITR%真覈錶達%轉染%COS-7%細胞
    mGITR%진핵표체%전염%COS-7%세포
    目的:构建小鼠GITR(mGITR)的真核表达载体,转染COS-7 细胞表达小鼠GITR 蛋白.方法:用TRIzol 试剂抽提小鼠脾细胞总RNA,经RT-PCR 扩增出GITR 全长基因,构建真核重组载体pIRES2-EGFP-mGITR,经鉴定后采用脂质体介导DNA 法转染COS-7 细胞.结果:从小鼠脾细胞中成功扩增得到GITR 全长基因.重组载体pIRES2-EGFP-mGITR 转染COS-7 细胞后,经荧光显微镜观察可见绿色荧光,提取蛋白后经蛋白质印迹鉴定有目的蛋白mGITR.结论:成功构建了小鼠GITR 基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-mGITR,转染COS-7细胞后mGITR蛋白获得成功表达.
    목적:구건소서GITR(mGITR)적진핵표체재체,전염COS-7 세포표체소서GITR 단백.방법:용TRIzol 시제추제소서비세포총RNA,경RT-PCR 확증출GITR 전장기인,구건진핵중조재체pIRES2-EGFP-mGITR,경감정후채용지질체개도DNA 법전염COS-7 세포.결과:종소서비세포중성공확증득도GITR 전장기인.중조재체pIRES2-EGFP-mGITR 전염COS-7 세포후,경형광현미경관찰가견록색형광,제취단백후경단백질인적감정유목적단백mGITR.결론:성공구건료소서GITR 기인적진핵표체재체pIRES2-EGFP-mGITR,전염COS-7세포후mGITR단백획득성공표체.
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