分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2010年
8期
1161-1166
,共6页
连冬生%张相年%贺宝霞%赵树进%韩丽萍
連鼕生%張相年%賀寶霞%趙樹進%韓麗萍
련동생%장상년%하보하%조수진%한려평
脱氧核糖核酸%毛细管电泳%基质场放大%柱头场放大%聚合酶链式反应产物
脫氧覈糖覈痠%毛細管電泳%基質場放大%柱頭場放大%聚閤酶鏈式反應產物
탈양핵당핵산%모세관전영%기질장방대%주두장방대%취합매련식반응산물
以已知浓度的DNA Marker为标准样品,常规压力进样,电动进样,柱头场放大及联合使用基质场放大和柱头场放大等方法进行CGE-UV分析,对比不同进样方法的检测灵敏度.以聚合酶链式反应(PCR)后的高盐DNA样品验证方法的可靠性.当DNA样品稀释达40万倍,与电动进样和压力进样相比,在对峰形和峰宽无明显影响下,将电动进样的时间延至420 s,三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液(TE)浓度降低至1.5%,柱头场放大灵敏度分别提高了约28和90倍;联合使用基质场放大和柱头场放大后,灵敏度分别提高3760和12000倍.DNA的检出限达0.1 μg/L(S/N=3,CGE-FASI-UV).同时以本法分析PCR后的DNA产物获得了极高的灵敏度(分别比普通的压力进样和电动进样提高50477倍和33354倍).本实验采用基质场放大和柱头场放大联用,方法操作简单,灵敏度高,适用于高盐微量的DNA样品分析.
以已知濃度的DNA Marker為標準樣品,常規壓力進樣,電動進樣,柱頭場放大及聯閤使用基質場放大和柱頭場放大等方法進行CGE-UV分析,對比不同進樣方法的檢測靈敏度.以聚閤酶鏈式反應(PCR)後的高鹽DNA樣品驗證方法的可靠性.噹DNA樣品稀釋達40萬倍,與電動進樣和壓力進樣相比,在對峰形和峰寬無明顯影響下,將電動進樣的時間延至420 s,三羥甲基氨基甲烷-鹽痠緩遲液(TE)濃度降低至1.5%,柱頭場放大靈敏度分彆提高瞭約28和90倍;聯閤使用基質場放大和柱頭場放大後,靈敏度分彆提高3760和12000倍.DNA的檢齣限達0.1 μg/L(S/N=3,CGE-FASI-UV).同時以本法分析PCR後的DNA產物穫得瞭極高的靈敏度(分彆比普通的壓力進樣和電動進樣提高50477倍和33354倍).本實驗採用基質場放大和柱頭場放大聯用,方法操作簡單,靈敏度高,適用于高鹽微量的DNA樣品分析.
이이지농도적DNA Marker위표준양품,상규압력진양,전동진양,주두장방대급연합사용기질장방대화주두장방대등방법진행CGE-UV분석,대비불동진양방법적검측령민도.이취합매련식반응(PCR)후적고염DNA양품험증방법적가고성.당DNA양품희석체40만배,여전동진양화압력진양상비,재대봉형화봉관무명현영향하,장전동진양적시간연지420 s,삼간갑기안기갑완-염산완충액(TE)농도강저지1.5%,주두장방대령민도분별제고료약28화90배;연합사용기질장방대화주두장방대후,령민도분별제고3760화12000배.DNA적검출한체0.1 μg/L(S/N=3,CGE-FASI-UV).동시이본법분석PCR후적DNA산물획득료겁고적령민도(분별비보통적압력진양화전동진양제고50477배화33354배).본실험채용기질장방대화주두장방대련용,방법조작간단,령민도고,괄용우고염미량적DNA양품분석.