中国普外基础与临床杂志
中國普外基礎與臨床雜誌
중국보외기출여림상잡지
CHINESE JOURNAL OF BASES AND CLINICS IN GENERAL SURGERY
2010年
7期
707-712
,共6页
万涛%周宁新%徐东刚%吴加金%范文红%黄志强
萬濤%週寧新%徐東剛%吳加金%範文紅%黃誌彊
만도%주저신%서동강%오가금%범문홍%황지강
胆管癌%离子通道蛋白%FXYD6基因%克隆%功能区定位
膽管癌%離子通道蛋白%FXYD6基因%剋隆%功能區定位
담관암%리자통도단백%FXYD6기인%극륭%공능구정위
目的 从人组织cDNA文库克隆胆管癌相关基因FXYD6并进行功能区定位分析.方法利用人胎肝、脑及脾cDNA文库,通过Goldkey软件进行引物设计,从组织cDNA文库获得FXYD6全长和转录编码区序列,对其进行克隆与纯化; 对FXYD6基因重组克隆进行测序鉴定; 并应用GenBank核酸数据库及Goldkey软件对其功能区进行定位分析.结果 在胎肝和脑cDNA文库中,扩增出FXYD6特异条带,但在脾cDNA文库未见扩增产物.将PCR扩增产物与pGEM-T载体连接,进行转化后确认回收组、阳性对照组均可见单菌落生长.选取阳性克隆进行菌落收获和质粒提取,并行测序分析,该序列包含已测序FXYD6基因大片段和可能的编码区序列.通过序列分析,得到最可能编码区序列为+1相位编码区序列,进一步分析得到该基因产物作为膜蛋白的可能功能区分布.结论 FXYD6基因克隆、纯化及功能区定位的成功为进一步研究该基因的功能奠定了基础.
目的 從人組織cDNA文庫剋隆膽管癌相關基因FXYD6併進行功能區定位分析.方法利用人胎肝、腦及脾cDNA文庫,通過Goldkey軟件進行引物設計,從組織cDNA文庫穫得FXYD6全長和轉錄編碼區序列,對其進行剋隆與純化; 對FXYD6基因重組剋隆進行測序鑒定; 併應用GenBank覈痠數據庫及Goldkey軟件對其功能區進行定位分析.結果 在胎肝和腦cDNA文庫中,擴增齣FXYD6特異條帶,但在脾cDNA文庫未見擴增產物.將PCR擴增產物與pGEM-T載體連接,進行轉化後確認迴收組、暘性對照組均可見單菌落生長.選取暘性剋隆進行菌落收穫和質粒提取,併行測序分析,該序列包含已測序FXYD6基因大片段和可能的編碼區序列.通過序列分析,得到最可能編碼區序列為+1相位編碼區序列,進一步分析得到該基因產物作為膜蛋白的可能功能區分佈.結論 FXYD6基因剋隆、純化及功能區定位的成功為進一步研究該基因的功能奠定瞭基礎.
목적 종인조직cDNA문고극륭담관암상관기인FXYD6병진행공능구정위분석.방법이용인태간、뇌급비cDNA문고,통과Goldkey연건진행인물설계,종조직cDNA문고획득FXYD6전장화전록편마구서렬,대기진행극륭여순화; 대FXYD6기인중조극륭진행측서감정; 병응용GenBank핵산수거고급Goldkey연건대기공능구진행정위분석.결과 재태간화뇌cDNA문고중,확증출FXYD6특이조대,단재비cDNA문고미견확증산물.장PCR확증산물여pGEM-T재체련접,진행전화후학인회수조、양성대조조균가견단균락생장.선취양성극륭진행균락수획화질립제취,병행측서분석,해서렬포함이측서FXYD6기인대편단화가능적편마구서렬.통과서렬분석,득도최가능편마구서렬위+1상위편마구서렬,진일보분석득도해기인산물작위막단백적가능공능구분포.결론 FXYD6기인극륭、순화급공능구정위적성공위진일보연구해기인적공능전정료기출.
