高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2010年
12期
1309-1313
,共5页
邴欣%汝少国%潘宗保%王蔚
邴訢%汝少國%潘宗保%王蔚
병흔%여소국%반종보%왕위
真鲷%卵黄原蛋白%分离纯化%抗血清
真鯛%卵黃原蛋白%分離純化%抗血清
진조%란황원단백%분리순화%항혈청
采用分子筛和离子交换两步层析法分离纯化了真鲷(Pagrosomus major)的卵黄原蛋白(VTG),并采用非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了真鲷VTG的分子量,发现真鲷VTG在非变性条件下的分子量大约为450kDa;在SDS变性条件下,两条亚基的分子量大约分别为170kDa和120kDa.Western-blot检测结果表明这两条亚基都能够与真鲷VTG多克隆抗血清产生免疫反应,而真鲷VTG的170kDa亚基是检测真鲷VTG的特异性条带,且最低检出浓度为0.1μg L-1.鼠抗真鲷VTG多克隆抗血清对真鲷VTG具有良好的特异性,这一结果为采用真鲷为模式生物检测海洋环境雌激素奠定了实验基础.
採用分子篩和離子交換兩步層析法分離純化瞭真鯛(Pagrosomus major)的卵黃原蛋白(VTG),併採用非變性和變性聚丙烯酰胺凝膠電泳測定瞭真鯛VTG的分子量,髮現真鯛VTG在非變性條件下的分子量大約為450kDa;在SDS變性條件下,兩條亞基的分子量大約分彆為170kDa和120kDa.Western-blot檢測結果錶明這兩條亞基都能夠與真鯛VTG多剋隆抗血清產生免疫反應,而真鯛VTG的170kDa亞基是檢測真鯛VTG的特異性條帶,且最低檢齣濃度為0.1μg L-1.鼠抗真鯛VTG多剋隆抗血清對真鯛VTG具有良好的特異性,這一結果為採用真鯛為模式生物檢測海洋環境雌激素奠定瞭實驗基礎.
채용분자사화리자교환량보층석법분리순화료진조(Pagrosomus major)적란황원단백(VTG),병채용비변성화변성취병희선알응효전영측정료진조VTG적분자량,발현진조VTG재비변성조건하적분자량대약위450kDa;재SDS변성조건하,량조아기적분자량대약분별위170kDa화120kDa.Western-blot검측결과표명저량조아기도능구여진조VTG다극륭항혈청산생면역반응,이진조VTG적170kDa아기시검측진조VTG적특이성조대,차최저검출농도위0.1μg L-1.서항진조VTG다극륭항혈청대진조VTG구유량호적특이성,저일결과위채용진조위모식생물검측해양배경자격소전정료실험기출.
