江西农业大学学报
江西農業大學學報
강서농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS
2012年
3期
517-521,527
,共6页
伍艳芳%徐海宁%肖复明%熊振宇%江香梅
伍豔芳%徐海寧%肖複明%熊振宇%江香梅
오염방%서해저%초복명%웅진우%강향매
陈山红心杉%DNA提取方法%改良的CTAB法%SDS法
陳山紅心杉%DNA提取方法%改良的CTAB法%SDS法
진산홍심삼%DNA제취방법%개량적CTAB법%SDS법
采用尿素法、柠檬酸钠法、改良的CTAB法和SDS法4种方法提取陈山红心杉基因组DNA,并对提取效果进行比较和分析.结果表明,改良的CTAB法较适合陈山红心杉基因组DNA提取,其提取的DNA纯度高、质量好,具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点,A260/A280比值在1.8左右,且凝胶检测条带整齐清晰,杂质少、无明显降解.而尿素法和柠檬酸钠法难以提取基因组DNA,SDS法因提取的DNA有蛋白质、多糖等杂质污染均不太适用陈山红心杉基因组DNA提取.酶切分析也证明,改良的CTAB法提取的DNA适用于进行后续分子生物学分析.采用改良的CTAB法能够提取得到陈山红心杉幼叶、老叶、嫩芽和幼茎的基因组DNA产率不同,分别为158.4 μg/g、129.6 μg/g、177.6 μg/g和98.40μg/g.考虑到幼叶样品的采集要比嫩芽方便,因此,可以直接采用幼叶进行陈山红心杉基因组DNA提取.
採用尿素法、檸檬痠鈉法、改良的CTAB法和SDS法4種方法提取陳山紅心杉基因組DNA,併對提取效果進行比較和分析.結果錶明,改良的CTAB法較適閤陳山紅心杉基因組DNA提取,其提取的DNA純度高、質量好,具有典型的天然DNA分子的標準紫外吸收光譜特點,A260/A280比值在1.8左右,且凝膠檢測條帶整齊清晰,雜質少、無明顯降解.而尿素法和檸檬痠鈉法難以提取基因組DNA,SDS法因提取的DNA有蛋白質、多糖等雜質汙染均不太適用陳山紅心杉基因組DNA提取.酶切分析也證明,改良的CTAB法提取的DNA適用于進行後續分子生物學分析.採用改良的CTAB法能夠提取得到陳山紅心杉幼葉、老葉、嫩芽和幼莖的基因組DNA產率不同,分彆為158.4 μg/g、129.6 μg/g、177.6 μg/g和98.40μg/g.攷慮到幼葉樣品的採集要比嫩芽方便,因此,可以直接採用幼葉進行陳山紅心杉基因組DNA提取.
채용뇨소법、저몽산납법、개량적CTAB법화SDS법4충방법제취진산홍심삼기인조DNA,병대제취효과진행비교화분석.결과표명,개량적CTAB법교괄합진산홍심삼기인조DNA제취,기제취적DNA순도고、질량호,구유전형적천연DNA분자적표준자외흡수광보특점,A260/A280비치재1.8좌우,차응효검측조대정제청석,잡질소、무명현강해.이뇨소법화저몽산납법난이제취기인조DNA,SDS법인제취적DNA유단백질、다당등잡질오염균불태괄용진산홍심삼기인조DNA제취.매절분석야증명,개량적CTAB법제취적DNA괄용우진행후속분자생물학분석.채용개량적CTAB법능구제취득도진산홍심삼유협、로협、눈아화유경적기인조DNA산솔불동,분별위158.4 μg/g、129.6 μg/g、177.6 μg/g화98.40μg/g.고필도유협양품적채집요비눈아방편,인차,가이직접채용유협진행진산홍심삼기인조DNA제취.
