CAJ | 학술논문

目的探讨胰岛素对缺氧/复氧所诱导心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法通过给原代培养乳鼠心室肌细胞行缺氧2 h/复氧4 h,建立缺氧/复氧(anoxia/reoxygenation)心肌细胞损伤模型.于复氧期开始随机给予0.9%生理盐水(VC组)、胰岛素(INS组)、LY294002(LY组)、胰岛素+LY294002(INS+LY组)干预.于复氧4h后,利用2,4二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛(MDA)含量,原位末端标记法(TUNEL)和DNA梯带法(DNA Ladder)标测细胞凋亡,免疫印迹法(Western blotting)检测磷酸化Akt表达,并比较各组间差异.结果与VC组相比,INS组中LDH活性、MDA含量、凋亡指数(AI)显著降低(P＜0.01),磷酸化Akt表达明显增加(P＜0.01);但上述指标变化可被LY294002(PI3K抑制剂)所抑制.结论在复氧早期给予胰岛素干预可显著地减少缺氧/复氧所诱导的心肌细胞凋亡,其保护机制与PI3K/Akt所介导的抗细胞凋亡作用有关.
목적탐토이도소대결양/복양소유도심기세포조망적영향급기궤제.방법통과급원대배양유서심실기세포행결양2 h/복양4 h,건립결양/복양(anoxia/reoxygenation)심기세포손상모형.우복양기개시수궤급여0.9%생리염수(VC조)、이도소(INS조)、LY294002(LY조)、이도소+LY294002(INS+LY조)간예.우복양4h후,이용2,4이초기분정현색법검측유산탈경매(LDH)활성,류대파비타산현색법검측병이철(MDA)함량,원위말단표기법(TUNEL)화DNA제대법(DNA Ladder)표측세포조망,면역인적법(Western blotting)검측린산화Akt표체,병비교각조간차이.결과여VC조상비,INS조중LDH활성、MDA함량、조망지수(AI)현저강저(P＜0.01),린산화Akt표체명현증가(P＜0.01);단상술지표변화가피LY294002(PI3K억제제)소억제.결론재복양조기급여이도소간예가현저지감소결양/복양소유도적심기세포조망,기보호궤제여PI3K/Akt소개도적항세포조망작용유관.