重组人pEGFP-heNOS质粒的构建及其在人内皮祖细胞中的表达
중조인pEGFP-heNOS질립적구건급기재인내피조세포중적표체
Construction of recombinant pEGFP-heNOS plasmid and its expression in EPC
  • 万方数据
    中华实验外科杂志 중화실험외과잡지
    CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
    2006年 11期 1364-1366 ,共3页

    廖传军%郭秒%郭连瑞%李建新%谷涌泉%俞恒锡%汪忠镐%张建

    료전군%곽초%곽련서%리건신%곡용천%유항석%왕충호%장건

    一氧化氮合酶%绿色荧光蛋白%基因转染%内皮细胞 一氧化氮閤酶%綠色熒光蛋白%基因轉染%內皮細胞
    일양화담합매%록색형광단백%기인전염%내피세포
    目的 构建含有增强绿色荧光蛋白报道基因(EGFP)的人内皮一氧化氮合酶(heNOS)重组质粒,观察其在人骨髓来源的内皮祖细胞(EPC)中的表达.方法 构建重组人pEGFP-heNOS质粒,脂质体转染人骨髓来源的内皮祖细胞,荧光显微镜下观测绿色荧光蛋白的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测heNOS在内皮祖细胞中的表达.结果 重组人pEGFP-heNOS质粒构建成功,体外转染入人内皮祖细胞中,在荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测到heNOS的表达.结论 重组人pEGFP-heNOS质粒体外转染入内皮祖细胞后,目的基因能够在细胞中有效表达,为下一步基因治疗提供了理论支持.
    목적 구건함유증강록색형광단백보도기인(EGFP)적인내피일양화담합매(heNOS)중조질립,관찰기재인골수래원적내피조세포(EPC)중적표체.방법 구건중조인pEGFP-heNOS질립,지질체전염인골수래원적내피조세포,형광현미경하관측록색형광단백적표체;역전록-취합매련반응(RT-PCR)화Western blot방법검측heNOS재내피조세포중적표체.결과 중조인pEGFP-heNOS질립구건성공,체외전염입인내피조세포중,재형광현미경하가견강록색형광단백적표체,RT-PCR화Western blot분별종mRNA화단백수평검측도heNOS적표체.결론 중조인pEGFP-heNOS질립체외전염입내피조세포후,목적기인능구재세포중유효표체,위하일보기인치료제공료이론지지.
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