中国兽医科技
中國獸醫科技
중국수의과기
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2005年
3期
181-185
,共5页
杜建%王志亮%宋厚辉%金宁一%张念祖
杜建%王誌亮%宋厚輝%金寧一%張唸祖
두건%왕지량%송후휘%금저일%장념조
马动脉炎病毒%膜蛋白基因%原核表达载体
馬動脈炎病毒%膜蛋白基因%原覈錶達載體
마동맥염병독%막단백기인%원핵표체재체
根据马动脉炎病毒膜蛋白(M)的核苷酸序列,设计合成了1对引物,从pUC18-M质粒中扩增出截短的膜蛋白M基因片段.对该片段及pGEX-6P-1载体双酶切并连接,成功构建了原核表达载体pGEX-6P-Mt.将此重组质粒转化BL21(DE3)宿主菌,对培养条件及诱导表达条件等影响表达的因素进行了优化;诱导后菌体裂解物经SDS-PAGE分析发现,在约34ku处出现了1条特异性的蛋白条带,其分子质量与预期的M截短蛋白的分子质量相符,并随着诱导时间的延长而变化,在诱导后4h达到高峰.结果表明,膜蛋白M基因截短型在大肠埃希氏菌中得到了高效表达.
根據馬動脈炎病毒膜蛋白(M)的覈苷痠序列,設計閤成瞭1對引物,從pUC18-M質粒中擴增齣截短的膜蛋白M基因片段.對該片段及pGEX-6P-1載體雙酶切併連接,成功構建瞭原覈錶達載體pGEX-6P-Mt.將此重組質粒轉化BL21(DE3)宿主菌,對培養條件及誘導錶達條件等影響錶達的因素進行瞭優化;誘導後菌體裂解物經SDS-PAGE分析髮現,在約34ku處齣現瞭1條特異性的蛋白條帶,其分子質量與預期的M截短蛋白的分子質量相符,併隨著誘導時間的延長而變化,在誘導後4h達到高峰.結果錶明,膜蛋白M基因截短型在大腸埃希氏菌中得到瞭高效錶達.
근거마동맥염병독막단백(M)적핵감산서렬,설계합성료1대인물,종pUC18-M질립중확증출절단적막단백M기인편단.대해편단급pGEX-6P-1재체쌍매절병련접,성공구건료원핵표체재체pGEX-6P-Mt.장차중조질립전화BL21(DE3)숙주균,대배양조건급유도표체조건등영향표체적인소진행료우화;유도후균체렬해물경SDS-PAGE분석발현,재약34ku처출현료1조특이성적단백조대,기분자질량여예기적M절단단백적분자질량상부,병수착유도시간적연장이변화,재유도후4h체도고봉.결과표명,막단백M기인절단형재대장애희씨균중득도료고효표체.
