中西医结合学报
中西醫結閤學報
중서의결합학보
JOURNAL OF CHINESE INTEGRATIVE MDEICINE
2006年
6期
639-643
,共5页
启动子%2A12%E8%乙型肝炎表面抗原%植物
啟動子%2A12%E8%乙型肝炎錶麵抗原%植物
계동자%2A12%E8%을형간염표면항원%식물
目的:构建果实特异性启动子驱动的含乙肝表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)植物表达载体,进一步提高外源目的基因的表达量,为研制有效的转基因植物防乙肝病毒疫苗打下基础.方法:将番茄果实特异性启动子基因2A12和E8,分别插入到pBPFΩ7构建中间载体pB2A12和pBE8;酶切YEP-HBs载体中的HBsAg小蛋白,并插入到pB2A12和pBE8,得到载体pB2A12-HBs和pBE8-HBs;将其中"p35S+2A12+Ω+HBsAg-s+Tnos"片段和"p35S+E8+Ω+HBsAg-s+Tnos"片段分别亚克隆到pCAMBIA1301,得到植物表达载体pCAM2A12-HBs和pCAME8-HBs.测序鉴定pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs中的启动子和HBsAg片段.最后将pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs转化根癌农杆菌EHA105.结果:重组质粒用酶切鉴定均得到预期片段,pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs的测序结果正确.结论:本实验成功构建了番茄果实特异性启动子和CaMV35S组成型启动子共同驱动HBsAg基因的植物表达载体.
目的:構建果實特異性啟動子驅動的含乙肝錶麵抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)植物錶達載體,進一步提高外源目的基因的錶達量,為研製有效的轉基因植物防乙肝病毒疫苗打下基礎.方法:將番茄果實特異性啟動子基因2A12和E8,分彆插入到pBPFΩ7構建中間載體pB2A12和pBE8;酶切YEP-HBs載體中的HBsAg小蛋白,併插入到pB2A12和pBE8,得到載體pB2A12-HBs和pBE8-HBs;將其中"p35S+2A12+Ω+HBsAg-s+Tnos"片段和"p35S+E8+Ω+HBsAg-s+Tnos"片段分彆亞剋隆到pCAMBIA1301,得到植物錶達載體pCAM2A12-HBs和pCAME8-HBs.測序鑒定pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs中的啟動子和HBsAg片段.最後將pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs轉化根癌農桿菌EHA105.結果:重組質粒用酶切鑒定均得到預期片段,pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs的測序結果正確.結論:本實驗成功構建瞭番茄果實特異性啟動子和CaMV35S組成型啟動子共同驅動HBsAg基因的植物錶達載體.
목적:구건과실특이성계동자구동적함을간표면항원(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)식물표체재체,진일보제고외원목적기인적표체량,위연제유효적전기인식물방을간병독역묘타하기출.방법:장번가과실특이성계동자기인2A12화E8,분별삽입도pBPFΩ7구건중간재체pB2A12화pBE8;매절YEP-HBs재체중적HBsAg소단백,병삽입도pB2A12화pBE8,득도재체pB2A12-HBs화pBE8-HBs;장기중"p35S+2A12+Ω+HBsAg-s+Tnos"편단화"p35S+E8+Ω+HBsAg-s+Tnos"편단분별아극륭도pCAMBIA1301,득도식물표체재체pCAM2A12-HBs화pCAME8-HBs.측서감정pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs중적계동자화HBsAg편단.최후장pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs전화근암농간균EHA105.결과:중조질립용매절감정균득도예기편단,pCAM2A12-HBs、pCAME8-HBs적측서결과정학.결론:본실험성공구건료번가과실특이성계동자화CaMV35S조성형계동자공동구동HBsAg기인적식물표체재체.
