微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2007年
2期
236-240
,共5页
瑞特普酶%复性%包涵体%融合蛋白
瑞特普酶%複性%包涵體%融閤蛋白
서특보매%복성%포함체%융합단백
大肠杆菌高密度发酵以包涵体形式表达融合蛋白Trx-rPA,表达量22%.包涵体蛋白洗涤后经金属螯合层析纯化,纯度达80%以上.经胱氨酸衍生,以脉冲加样形式复性,复性率可高达30%.经ETI-Sepharose纯化,复性的融合蛋白生物活性可达3.5×105IU/mgPr..融合蛋白可被rEK酶切释放rPA,酶切效率达85%以上.酶切液经IDA-Sepharose和SP-Sepharose层析纯化,rPA纯度达98%以上,生物活性50万IU/mgPr..1L发酵液经分离、复性及纯化后,可得高纯度rPA 300mg以上.
大腸桿菌高密度髮酵以包涵體形式錶達融閤蛋白Trx-rPA,錶達量22%.包涵體蛋白洗滌後經金屬螯閤層析純化,純度達80%以上.經胱氨痠衍生,以脈遲加樣形式複性,複性率可高達30%.經ETI-Sepharose純化,複性的融閤蛋白生物活性可達3.5×105IU/mgPr..融閤蛋白可被rEK酶切釋放rPA,酶切效率達85%以上.酶切液經IDA-Sepharose和SP-Sepharose層析純化,rPA純度達98%以上,生物活性50萬IU/mgPr..1L髮酵液經分離、複性及純化後,可得高純度rPA 300mg以上.
대장간균고밀도발효이포함체형식표체융합단백Trx-rPA,표체량22%.포함체단백세조후경금속오합층석순화,순도체80%이상.경광안산연생,이맥충가양형식복성,복성솔가고체30%.경ETI-Sepharose순화,복성적융합단백생물활성가체3.5×105IU/mgPr..융합단백가피rEK매절석방rPA,매절효솔체85%이상.매절액경IDA-Sepharose화SP-Sepharose층석순화,rPA순도체98%이상,생물활성50만IU/mgPr..1L발효액경분리、복성급순화후,가득고순도rPA 300mg이상.
