微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2009年
4期
44-48
,共5页
史俊岩%王美莲%刘兵%罗恩杰
史俊巖%王美蓮%劉兵%囉恩傑
사준암%왕미련%류병%라은걸
麻疹病毒%siRNA%鉴定
痳疹病毒%siRNA%鑒定
마진병독%siRNA%감정
为了鉴定抑制麻疹病毒体外复制的靶向Rab9 GTPase基因效应性小干扰RNA(siRNA),根据siRNA设计原则和Rab9 GTPase基因的mRNA序列,设计并化学合成8对靶向Rab9 GTPase基因的siRNAs和1对阴性对照siRNA,经脂质体法转染Vero-E6细胞株,转染10 h后感染麻疹病毒Edmonston株.通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后细胞内Rab9 GTPase mRNA水平;通过标准蚀斑试验检测麻疹病毒滴度.同对照组相比,8对靶向Rab9 GTPase基因siRNAs中的2对(Rab9-4和Rab9-7),以时间和剂量依赖性的方式显著地抑制细胞内Rab9 GTPase mRNA表达和麻疹病毒的复制(抑制率高迭90%以上),其他的siRNAs对细胞内Rab9 GTPase mRNA表达和麻疹病毒的复制的抑制性效应则低于50%.结果表明,Rab9-4和Rab9-7是体外抑制麻疹病毒复制的最有效的siRNAs,这些siRNAs靶序列能被用来深入研究RNA干扰治疗麻疹病毒感染的可能性.
為瞭鑒定抑製痳疹病毒體外複製的靶嚮Rab9 GTPase基因效應性小榦擾RNA(siRNA),根據siRNA設計原則和Rab9 GTPase基因的mRNA序列,設計併化學閤成8對靶嚮Rab9 GTPase基因的siRNAs和1對陰性對照siRNA,經脂質體法轉染Vero-E6細胞株,轉染10 h後感染痳疹病毒Edmonston株.通過逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測轉染後細胞內Rab9 GTPase mRNA水平;通過標準蝕斑試驗檢測痳疹病毒滴度.同對照組相比,8對靶嚮Rab9 GTPase基因siRNAs中的2對(Rab9-4和Rab9-7),以時間和劑量依賴性的方式顯著地抑製細胞內Rab9 GTPase mRNA錶達和痳疹病毒的複製(抑製率高迭90%以上),其他的siRNAs對細胞內Rab9 GTPase mRNA錶達和痳疹病毒的複製的抑製性效應則低于50%.結果錶明,Rab9-4和Rab9-7是體外抑製痳疹病毒複製的最有效的siRNAs,這些siRNAs靶序列能被用來深入研究RNA榦擾治療痳疹病毒感染的可能性.
위료감정억제마진병독체외복제적파향Rab9 GTPase기인효응성소간우RNA(siRNA),근거siRNA설계원칙화Rab9 GTPase기인적mRNA서렬,설계병화학합성8대파향Rab9 GTPase기인적siRNAs화1대음성대조siRNA,경지질체법전염Vero-E6세포주,전염10 h후감염마진병독Edmonston주.통과역전록취합매련반응(RT-PCR)검측전염후세포내Rab9 GTPase mRNA수평;통과표준식반시험검측마진병독적도.동대조조상비,8대파향Rab9 GTPase기인siRNAs중적2대(Rab9-4화Rab9-7),이시간화제량의뢰성적방식현저지억제세포내Rab9 GTPase mRNA표체화마진병독적복제(억제솔고질90%이상),기타적siRNAs대세포내Rab9 GTPase mRNA표체화마진병독적복제적억제성효응칙저우50%.결과표명,Rab9-4화Rab9-7시체외억제마진병독복제적최유효적siRNAs,저사siRNAs파서렬능피용래심입연구RNA간우치료마진병독감염적가능성.
