郑州大学学报（医学版）
鄭州大學學報（醫學版）
정주대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2010年
1期
11-15
,共5页
张威%陈玉%亚国伟%陈奎生
張威%陳玉%亞國偉%陳奎生
장위%진옥%아국위%진규생
食管肿瘤%癌%EC9706细胞%mTOR%RNA干扰%增殖%凋亡
食管腫瘤%癌%EC9706細胞%mTOR%RNA榦擾%增殖%凋亡
식관종류%암%EC9706세포%mTOR%RNA간우%증식%조망
目的:探讨RNA干扰技术对人食管癌EC9706细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长与凋亡的影响.方法:设计合成mTOR siRNA,采用低、中、高浓度(50、100与150 nmoL/L)的mTOR siRNA分别转染EC9706细胞24、48与72 h.同时设无义对照组(转染无义对照siRNA)、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不转染).采用免疫细胞化学与原位杂交法分别检测各组EC9706细胞中mTOR蛋白与mRNA的表达;应用MTT法检测细胞增殖,计算细胞生长抑制率;应用TUNEL法检测转染24 h时细胞凋亡,计算凋亡指数(AI).结果:转染24、48与72 h,6组细胞mTOR蛋白和mRNA的表达差异均有统计学意义(mTOR蛋白:F=24.14,45.78,59.19,P均＜0.001;mTOR mRNA:F=41.42,69.74,43.71,P均＜0.001),细胞生长抑制率差异亦有统计学意义(F=143.85,172.98,155.01,P均＜0.001);低、中、高浓度组转染不同时间点间比较,mTOR蛋白(F=42.23,29.46,50.22,P均＜0.001)、mTOR mRNA(F=6.48,8.50,4.80,P均＜0.05)及细胞生长抑制率(F=78.77,76.14,52.28,P均＜0.001)差异均有统计学意义.mTOR siRNA转染组EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达均低于各对照组,且mTOR蛋白及mRNA的表达随mTOR siRNA浓度的增加及转染时间的延长而减弱(P＜0.05).不同浓度mTOR siRNA转染组EC9706细胞生长抑制率均高于各对照组,且细胞生长抑制率随mTOR siRNA浓度的增加和转染时间的延长而升高(P＜0.05).转染24 h,6组细胞AI相比,差异有统计学意义(F=442.96,P＜0.001),mTOR siRNA转染组AI均高于各对照组,且高浓度转染组AI高(P＜0.05).结论:mTOR siRNA可有效抑制EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达,且能抑制EC9706细胞的增殖并促进其凋亡.
目的:探討RNA榦擾技術對人食管癌EC9706細胞哺乳動物雷帕黴素靶蛋白(mTOR)的錶達及細胞生長與凋亡的影響.方法:設計閤成mTOR siRNA,採用低、中、高濃度(50、100與150 nmoL/L)的mTOR siRNA分彆轉染EC9706細胞24、48與72 h.同時設無義對照組(轉染無義對照siRNA)、空白對照組(轉染空脂質體)及正常對照組(不轉染).採用免疫細胞化學與原位雜交法分彆檢測各組EC9706細胞中mTOR蛋白與mRNA的錶達;應用MTT法檢測細胞增殖,計算細胞生長抑製率;應用TUNEL法檢測轉染24 h時細胞凋亡,計算凋亡指數(AI).結果:轉染24、48與72 h,6組細胞mTOR蛋白和mRNA的錶達差異均有統計學意義(mTOR蛋白:F=24.14,45.78,59.19,P均＜0.001;mTOR mRNA:F=41.42,69.74,43.71,P均＜0.001),細胞生長抑製率差異亦有統計學意義(F=143.85,172.98,155.01,P均＜0.001);低、中、高濃度組轉染不同時間點間比較,mTOR蛋白(F=42.23,29.46,50.22,P均＜0.001)、mTOR mRNA(F=6.48,8.50,4.80,P均＜0.05)及細胞生長抑製率(F=78.77,76.14,52.28,P均＜0.001)差異均有統計學意義.mTOR siRNA轉染組EC9706細胞mTOR蛋白與mRNA的錶達均低于各對照組,且mTOR蛋白及mRNA的錶達隨mTOR siRNA濃度的增加及轉染時間的延長而減弱(P＜0.05).不同濃度mTOR siRNA轉染組EC9706細胞生長抑製率均高于各對照組,且細胞生長抑製率隨mTOR siRNA濃度的增加和轉染時間的延長而升高(P＜0.05).轉染24 h,6組細胞AI相比,差異有統計學意義(F=442.96,P＜0.001),mTOR siRNA轉染組AI均高于各對照組,且高濃度轉染組AI高(P＜0.05).結論:mTOR siRNA可有效抑製EC9706細胞mTOR蛋白與mRNA的錶達,且能抑製EC9706細胞的增殖併促進其凋亡.
목적:탐토RNA간우기술대인식관암EC9706세포포유동물뢰파매소파단백(mTOR)적표체급세포생장여조망적영향.방법:설계합성mTOR siRNA,채용저、중、고농도(50、100여150 nmoL/L)적mTOR siRNA분별전염EC9706세포24、48여72 h.동시설무의대조조(전염무의대조siRNA)、공백대조조(전염공지질체)급정상대조조(불전염).채용면역세포화학여원위잡교법분별검측각조EC9706세포중mTOR단백여mRNA적표체;응용MTT법검측세포증식,계산세포생장억제솔;응용TUNEL법검측전염24 h시세포조망,계산조망지수(AI).결과:전염24、48여72 h,6조세포mTOR단백화mRNA적표체차이균유통계학의의(mTOR단백:F=24.14,45.78,59.19,P균＜0.001;mTOR mRNA:F=41.42,69.74,43.71,P균＜0.001),세포생장억제솔차이역유통계학의의(F=143.85,172.98,155.01,P균＜0.001);저、중、고농도조전염불동시간점간비교,mTOR단백(F=42.23,29.46,50.22,P균＜0.001)、mTOR mRNA(F=6.48,8.50,4.80,P균＜0.05)급세포생장억제솔(F=78.77,76.14,52.28,P균＜0.001)차이균유통계학의의.mTOR siRNA전염조EC9706세포mTOR단백여mRNA적표체균저우각대조조,차mTOR단백급mRNA적표체수mTOR siRNA농도적증가급전염시간적연장이감약(P＜0.05).불동농도mTOR siRNA전염조EC9706세포생장억제솔균고우각대조조,차세포생장억제솔수mTOR siRNA농도적증가화전염시간적연장이승고(P＜0.05).전염24 h,6조세포AI상비,차이유통계학의의(F=442.96,P＜0.001),mTOR siRNA전염조AI균고우각대조조,차고농도전염조AI고(P＜0.05).결론:mTOR siRNA가유효억제EC9706세포mTOR단백여mRNA적표체,차능억제EC9706세포적증식병촉진기조망.
