老年医学与保健
老年醫學與保健
노년의학여보건
GERIATRICS & HEALTH CARE
2012年
1期
43-47
,共5页
王玉强%盛净%袁丽粉%吕楠%段诗悦%苏靖%金拓%陆平
王玉彊%盛淨%袁麗粉%呂楠%段詩悅%囌靖%金拓%陸平
왕옥강%성정%원려분%려남%단시열%소정%금탁%륙평
聚乙烯亚胺%非病毒基因载体%BRL-3A%细胞毒性%转染效率
聚乙烯亞胺%非病毒基因載體%BRL-3A%細胞毒性%轉染效率
취을희아알%비병독기인재체%BRL-3A%세포독성%전염효솔
目的 构建交联聚乙烯亚胺(Polyethylenemine,PEI)衍生物PEI-Bu,研究其对大鼠肝细胞系BRL-3A的细胞毒性和转染效率.方法 以PEI 800Da为骨架,1,4-丁二醇二氯甲酸酯为连接剂制备聚合物PEI-Bu,用凝胶渗透色谱法(GPC)测定分子量,动态光散射法(DLS)测定PEI-Bu/pDNA复合物的粒径和Zeta电位,琼脂糖凝胶电泳考察其复合质粒DNA的能力.MTT法榆测PEI-Bu对BRL-3A的细胞毒性,以荧光素酶质粒作为报告基因,测定PEI-Bu/pDNA复合物在BRL-3A细胞中的转染效率.结果 GPC 测定分子量为Mw4289Da,多分散指数1.31,复合物的粒径为138-16lnm,Zeta电位为2.4-4.3mV,凝胶电泳表明在质量比大于1时 PEI-Bu 具有复合DNA的能力,在同一浓度下PEI-Bu的细胞的毒性小于PEI 25kDa (p<0.01),PEI-Bu/pDNA在质量比为5时达到最高转染效率,高于PEl25kDa (p<0.01).并与Lipofectamine2000 相当 (P>0.05).结论 PEI-Bu对BRL-3A 细胞是一种低细胞毒性、高转染效率的非病毒基因载体,在肝细胞基因治疗领域中具有潜在的应用前景.
目的 構建交聯聚乙烯亞胺(Polyethylenemine,PEI)衍生物PEI-Bu,研究其對大鼠肝細胞繫BRL-3A的細胞毒性和轉染效率.方法 以PEI 800Da為骨架,1,4-丁二醇二氯甲痠酯為連接劑製備聚閤物PEI-Bu,用凝膠滲透色譜法(GPC)測定分子量,動態光散射法(DLS)測定PEI-Bu/pDNA複閤物的粒徑和Zeta電位,瓊脂糖凝膠電泳攷察其複閤質粒DNA的能力.MTT法榆測PEI-Bu對BRL-3A的細胞毒性,以熒光素酶質粒作為報告基因,測定PEI-Bu/pDNA複閤物在BRL-3A細胞中的轉染效率.結果 GPC 測定分子量為Mw4289Da,多分散指數1.31,複閤物的粒徑為138-16lnm,Zeta電位為2.4-4.3mV,凝膠電泳錶明在質量比大于1時 PEI-Bu 具有複閤DNA的能力,在同一濃度下PEI-Bu的細胞的毒性小于PEI 25kDa (p<0.01),PEI-Bu/pDNA在質量比為5時達到最高轉染效率,高于PEl25kDa (p<0.01).併與Lipofectamine2000 相噹 (P>0.05).結論 PEI-Bu對BRL-3A 細胞是一種低細胞毒性、高轉染效率的非病毒基因載體,在肝細胞基因治療領域中具有潛在的應用前景.
목적 구건교련취을희아알(Polyethylenemine,PEI)연생물PEI-Bu,연구기대대서간세포계BRL-3A적세포독성화전염효솔.방법 이PEI 800Da위골가,1,4-정이순이록갑산지위련접제제비취합물PEI-Bu,용응효삼투색보법(GPC)측정분자량,동태광산사법(DLS)측정PEI-Bu/pDNA복합물적립경화Zeta전위,경지당응효전영고찰기복합질립DNA적능력.MTT법유측PEI-Bu대BRL-3A적세포독성,이형광소매질립작위보고기인,측정PEI-Bu/pDNA복합물재BRL-3A세포중적전염효솔.결과 GPC 측정분자량위Mw4289Da,다분산지수1.31,복합물적립경위138-16lnm,Zeta전위위2.4-4.3mV,응효전영표명재질량비대우1시 PEI-Bu 구유복합DNA적능력,재동일농도하PEI-Bu적세포적독성소우PEI 25kDa (p<0.01),PEI-Bu/pDNA재질량비위5시체도최고전염효솔,고우PEl25kDa (p<0.01).병여Lipofectamine2000 상당 (P>0.05).결론 PEI-Bu대BRL-3A 세포시일충저세포독성、고전염효솔적비병독기인재체,재간세포기인치료영역중구유잠재적응용전경.
