广东药学院学报
廣東藥學院學報
엄동약학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF GUANGDONG COLLEGE OF PHARMACY
2005年
6期
715-718
,共4页
DNA疫苗%严重急性呼吸综合征%冠状病毒%S蛋白%基因组合
DNA疫苗%嚴重急性呼吸綜閤徵%冠狀病毒%S蛋白%基因組閤
DNA역묘%엄중급성호흡종합정%관상병독%S단백%기인조합
目的构建以SARS冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)S蛋白3个保守片段基因的组合为抗原基因DNA疫苗,采用肌肉注射的方法接种小鼠后观察机体产生免疫应答的情况.方法将人工合成的S蛋白3个保守片段基因组合(称为Sa)克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),随之将重组质粒进行小鼠肌肉免疫,定期检测血清中抗SARS-CoV的病毒特异性抗体水平,流式细胞仪观察其淋巴细胞表型变化,PCR法检测质粒分布,免疫组化检测抗原表达.结果疫苗注射后15 d就能在血清中检测出病毒特异性抗体,并且疫苗能在机体中持续表达抗原引发机体持续的免疫应答,直到注射后45 d免疫应答都不见减弱;以CTL T淋巴细胞为主的CD8+T淋巴细胞的百分比含量增加极显著,引起强大的体液免疫和细胞免疫;而空载体质粒对照组未检测出明显的特异性免疫应答.结论以S蛋白3个保守片段基因组合为抗原基因的DNA疫苗通过肌注能诱导小鼠针对SARS病毒强大的免疫应答.
目的構建以SARS冠狀病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)S蛋白3箇保守片段基因的組閤為抗原基因DNA疫苗,採用肌肉註射的方法接種小鼠後觀察機體產生免疫應答的情況.方法將人工閤成的S蛋白3箇保守片段基因組閤(稱為Sa)剋隆至真覈錶達載體pcDNA3.1(-),隨之將重組質粒進行小鼠肌肉免疫,定期檢測血清中抗SARS-CoV的病毒特異性抗體水平,流式細胞儀觀察其淋巴細胞錶型變化,PCR法檢測質粒分佈,免疫組化檢測抗原錶達.結果疫苗註射後15 d就能在血清中檢測齣病毒特異性抗體,併且疫苗能在機體中持續錶達抗原引髮機體持續的免疫應答,直到註射後45 d免疫應答都不見減弱;以CTL T淋巴細胞為主的CD8+T淋巴細胞的百分比含量增加極顯著,引起彊大的體液免疫和細胞免疫;而空載體質粒對照組未檢測齣明顯的特異性免疫應答.結論以S蛋白3箇保守片段基因組閤為抗原基因的DNA疫苗通過肌註能誘導小鼠針對SARS病毒彊大的免疫應答.
목적구건이SARS관상병독(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)S단백3개보수편단기인적조합위항원기인DNA역묘,채용기육주사적방법접충소서후관찰궤체산생면역응답적정황.방법장인공합성적S단백3개보수편단기인조합(칭위Sa)극륭지진핵표체재체pcDNA3.1(-),수지장중조질립진행소서기육면역,정기검측혈청중항SARS-CoV적병독특이성항체수평,류식세포의관찰기림파세포표형변화,PCR법검측질립분포,면역조화검측항원표체.결과역묘주사후15 d취능재혈청중검측출병독특이성항체,병차역묘능재궤체중지속표체항원인발궤체지속적면역응답,직도주사후45 d면역응답도불견감약;이CTL T림파세포위주적CD8+T림파세포적백분비함량증가겁현저,인기강대적체액면역화세포면역;이공재체질립대조조미검측출명현적특이성면역응답.결론이S단백3개보수편단기인조합위항원기인적DNA역묘통과기주능유도소서침대SARS병독강대적면역응답.
