天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2005年
8期
508-510
,共3页
谢立%陈万荣%张明程%黄德庄%贺立香
謝立%陳萬榮%張明程%黃德莊%賀立香
사립%진만영%장명정%황덕장%하립향
肝炎%丙型%肝炎病毒%杂交瘤%抗体%单克隆%酶联免疫吸附测定
肝炎%丙型%肝炎病毒%雜交瘤%抗體%單剋隆%酶聯免疫吸附測定
간염%병형%간염병독%잡교류%항체%단극륭%매련면역흡부측정
目的:以基因工程表达的丙型肝炎病毒抗原蛋白(HCAg)为抗原,建立分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的McAb进行鉴定.方法:用纯化HCV基因工程表达抗原(HCAg)免疫Balb/c小鼠,取脾细胞及骨髓瘤细胞按常规方法融合、筛选、克隆化及腹水注射制备McAb.采用ELISA及分片断鉴定技术进行鉴定.结果:筛选出5株能稳定分泌特异性抗-HC的McAb杂交瘤细胞株,经多次复苏传代仍能稳定分泌抗体,特异性强,效价高.与不同抗原蛋白的ELISA反应呈特异性阳性反应.分片断鉴定结果显示,所获5株McAb主要为抗HCV核心蛋白和非结构蛋白NS3.结论:此5株丙肝杂交瘤细胞株分泌的抗体对丙肝抗原具有特异亲和性,为丙型肝炎病毒抗原诊断试剂的研制提供了关键技术基础.
目的:以基因工程錶達的丙型肝炎病毒抗原蛋白(HCAg)為抗原,建立分泌單剋隆抗體(McAb)的雜交瘤細胞繫,併對其分泌的McAb進行鑒定.方法:用純化HCV基因工程錶達抗原(HCAg)免疫Balb/c小鼠,取脾細胞及骨髓瘤細胞按常規方法融閤、篩選、剋隆化及腹水註射製備McAb.採用ELISA及分片斷鑒定技術進行鑒定.結果:篩選齣5株能穩定分泌特異性抗-HC的McAb雜交瘤細胞株,經多次複囌傳代仍能穩定分泌抗體,特異性彊,效價高.與不同抗原蛋白的ELISA反應呈特異性暘性反應.分片斷鑒定結果顯示,所穫5株McAb主要為抗HCV覈心蛋白和非結構蛋白NS3.結論:此5株丙肝雜交瘤細胞株分泌的抗體對丙肝抗原具有特異親和性,為丙型肝炎病毒抗原診斷試劑的研製提供瞭關鍵技術基礎.
목적:이기인공정표체적병형간염병독항원단백(HCAg)위항원,건립분비단극륭항체(McAb)적잡교류세포계,병대기분비적McAb진행감정.방법:용순화HCV기인공정표체항원(HCAg)면역Balb/c소서,취비세포급골수류세포안상규방법융합、사선、극륭화급복수주사제비McAb.채용ELISA급분편단감정기술진행감정.결과:사선출5주능은정분비특이성항-HC적McAb잡교류세포주,경다차복소전대잉능은정분비항체,특이성강,효개고.여불동항원단백적ELISA반응정특이성양성반응.분편단감정결과현시,소획5주McAb주요위항HCV핵심단백화비결구단백NS3.결론:차5주병간잡교류세포주분비적항체대병간항원구유특이친화성,위병형간염병독항원진단시제적연제제공료관건기술기출.