山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2005年
10期
877-880,884
,共5页
孙妍琳%周庚寅%赵胜梅%牟坤%张翠娟%张晓芳%相磊
孫妍琳%週庚寅%趙勝梅%牟坤%張翠娟%張曉芳%相磊
손연림%주경인%조성매%모곤%장취연%장효방%상뢰
葡萄糖神经酰胺合成酶%乳腺肿瘤%抗药性,多药
葡萄糖神經酰胺閤成酶%乳腺腫瘤%抗藥性,多藥
포도당신경선알합성매%유선종류%항약성,다약
目的:探讨靶向葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)对乳腺癌多药耐药的逆转作用及机制.方法:GCS反义寡核苷酸(GCS ASODN)转染人耐药乳腺癌细胞MCF-7/AdrR,RTPCR检测细胞GCS和多药耐药基因1(MDR1)mRNA的表达,免疫细胞化学染色检测细胞GCS蛋白和P-糖蛋白(P-gp)的表达,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡.Caspase-3活性测定法检测Caspase-3活性改变.结果:GCS ASODN转染人耐药乳腺癌细胞MCF-7/AdrR后,GCS和MDR1mRNA的表达水平分别为0.3、0.7,GCS蛋白和P-gp表达阳性率分别为23%、33%,GCS和MDR1的mRNA和蛋白水平较对照组有显著性差异(P＜0.05).转染后细胞周期改变不明显,但细胞凋亡增加为13.7±4.1,Caspase-3活性升高为0.072 5±0.0003,与对照组差异有显著性(P＜0.01).结论:靶向GCS通过直接抑制GCS活性,并间接下调MDR1mRNA和蛋白表达,激活Caspase-3活性,诱导耐药细胞凋亡增加,有效逆转乳腺癌多药耐药.
目的:探討靶嚮葡萄糖神經酰胺閤成酶(glucosylceramide synthase,GCS)對乳腺癌多藥耐藥的逆轉作用及機製.方法:GCS反義寡覈苷痠(GCS ASODN)轉染人耐藥乳腺癌細胞MCF-7/AdrR,RTPCR檢測細胞GCS和多藥耐藥基因1(MDR1)mRNA的錶達,免疫細胞化學染色檢測細胞GCS蛋白和P-糖蛋白(P-gp)的錶達,流式細胞儀分析細胞週期和凋亡.Caspase-3活性測定法檢測Caspase-3活性改變.結果:GCS ASODN轉染人耐藥乳腺癌細胞MCF-7/AdrR後,GCS和MDR1mRNA的錶達水平分彆為0.3、0.7,GCS蛋白和P-gp錶達暘性率分彆為23%、33%,GCS和MDR1的mRNA和蛋白水平較對照組有顯著性差異(P＜0.05).轉染後細胞週期改變不明顯,但細胞凋亡增加為13.7±4.1,Caspase-3活性升高為0.072 5±0.0003,與對照組差異有顯著性(P＜0.01).結論:靶嚮GCS通過直接抑製GCS活性,併間接下調MDR1mRNA和蛋白錶達,激活Caspase-3活性,誘導耐藥細胞凋亡增加,有效逆轉乳腺癌多藥耐藥.
목적:탐토파향포도당신경선알합성매(glucosylceramide synthase,GCS)대유선암다약내약적역전작용급궤제.방법:GCS반의과핵감산(GCS ASODN)전염인내약유선암세포MCF-7/AdrR,RTPCR검측세포GCS화다약내약기인1(MDR1)mRNA적표체,면역세포화학염색검측세포GCS단백화P-당단백(P-gp)적표체,류식세포의분석세포주기화조망.Caspase-3활성측정법검측Caspase-3활성개변.결과:GCS ASODN전염인내약유선암세포MCF-7/AdrR후,GCS화MDR1mRNA적표체수평분별위0.3、0.7,GCS단백화P-gp표체양성솔분별위23%、33%,GCS화MDR1적mRNA화단백수평교대조조유현저성차이(P＜0.05).전염후세포주기개변불명현,단세포조망증가위13.7±4.1,Caspase-3활성승고위0.072 5±0.0003,여대조조차이유현저성(P＜0.01).결론:파향GCS통과직접억제GCS활성,병간접하조MDR1mRNA화단백표체,격활Caspase-3활성,유도내약세포조망증가,유효역전유선암다약내약.
