CAJ | 학술논문

丙型肝炎病毒(HCV)基因易发生变异,尤其是含中和抗原表位的高变区1(HVR1)变异性最大.模拟HVR1的B细胞表位具有涵盖多种天然表位的抗原特性,保守的T细胞表位具有各型间的相对保守性.为解决HCV高变性造成的疫苗研究障碍,我们选取HCV E2区HVR1(384～410 aa)模拟B细胞表位9条、C区的保守CTL表位2条(35～44 aa,132～140 aa)、NS3区保守的CTL表位1条(1073～1081 aa)及NS3区保守的Th表位1条(aa 1251～1259),各表位之间以插入3个氨基酸为连接臂,人工合成上述13条表位基因串联的HCV多表位抗原基因(mfc).将mfc与gst基因融合,表达了多表位抗原蛋白GST-MFC.同时,构建了白介素-2信号肽基因、PADRE表位基因和mfc基因串联的候选HCV DNA疫苗,即质粒pVAX1.0-st-mfc.以GST-MFC蛋白免疫家兔和质粒pVAX1.0-st-mfc免疫小鼠,采用ELISA和Western blot方法,应用10条具有代表性的HCV HVR1合成肽进行检测,证明有9条HVR1合成肽能与所有免疫动物血清反应,交叉反应率(cross reactivity,CR)为90%.应用HCV抗体阳性的感染者血清与多表位抗原GST-MFC蛋白进行反应,证明其反应识别率(reactivity frequency,RF)为75%.上述结果表明,筛选合成的HCV多表位抗原基因mfc具有HCV中和抗原表位的特征,可作为HCV疫苗研制的候选基因.
병형간염병독(HCV)기인역발생변이,우기시함중화항원표위적고변구1(HVR1)변이성최대.모의HVR1적B세포표위구유함개다충천연표위적항원특성,보수적T세포표위구유각형간적상대보수성.위해결HCV고변성조성적역묘연구장애,아문선취HCV E2구HVR1(384～410 aa)모의B세포표위9조、C구적보수CTL표위2조(35～44 aa,132～140 aa)、NS3구보수적CTL표위1조(1073～1081 aa)급NS3구보수적Th표위1조(aa 1251～1259),각표위지간이삽입3개안기산위련접비,인공합성상술13조표위기인천련적HCV다표위항원기인(mfc).장mfc여gst기인융합,표체료다표위항원단백GST-MFC.동시,구건료백개소-2신호태기인、PADRE표위기인화mfc기인천련적후선HCV DNA역묘,즉질립pVAX1.0-st-mfc.이GST-MFC단백면역가토화질립pVAX1.0-st-mfc면역소서,채용ELISA화Western blot방법,응용10조구유대표성적HCV HVR1합성태진행검측,증명유9조HVR1합성태능여소유면역동물혈청반응,교차반응솔(cross reactivity,CR)위90%.응용HCV항체양성적감염자혈청여다표위항원GST-MFC단백진행반응,증명기반응식별솔(reactivity frequency,RF)위75%.상술결과표명,사선합성적HCV다표위항원기인mfc구유HCV중화항원표위적특정,가작위HCV역묘연제적후선기인.