CAJ | 학술논문

目的:采用新生牛跟腱制备生物医用胶原蛋白海绵,通过分别接种Vero细胞、天祝白牦牛胚胎皮肤原代细胞和岷县黑紫羔羊睾丸原代细胞至胶原蛋白海绵组织支架上,观察新生牛跟腱胶原蛋白海绵与3种细胞的生物相容性.方法:实验于2006-02/05在西北民族大学生命科学与工程学院生物工程与技术国家民委重点实验室完成.①用新生牛跟腱经冰醋酸、胃蛋白酶等消化,经盐析、透析及冻干等处理后,制备成胶原蛋白海绵.②在六孔板中,将Vero细胞、天祝白牦牛胚胎皮肤原代细胞和岷县黑紫羔羊睾丸原代细胞分别接种于经紫外线、臭氧灭菌后的胶原蛋白海绵上,经37℃体积分数为0.05的CO2恒温培养;并用另一组细胞在凯氏瓶中培养作对照实验.用奥林帕斯倒置相差显微镜及JVC摄像系统观察、拍摄与记录细胞生长情况,并于培养11d,用考马斯亮蓝和苏木精-伊红染色,证实相差显微镜观察的结果.结果:①胶原蛋白海绵制备结果:用新生牛跟腱制备得到具有一定孔隙度的胶原蛋白海绵,经紫外线、臭氧灭菌后可进行细胞培养.②3种细胞在胶原蛋白海绵上和六孔板底的生长情况:3种细胞接种后5 h,在胶原蛋白海绵周围的六孔板孔底可看到Vero细胞已贴壁、伸展,个别细胞有分裂现象,在胶原蛋白海绵表面,隐约可见圆形细胞排列.Vero细胞和天祝白牦牛胚胎皮肤原代f2细胞接种72 h、岷县黑裘皮羔羊睾丸原代f2细胞接种48 h时,孔底细胞已经铺满单层,但与对照孔比较,生长速度较慢.②3种细胞用考马斯亮蓝细胞骨架染色和苏木精-伊红染色的结果:培养到第11天,3种来自不同动物、不同组织的细胞接种的胶原蛋白海绵支架孔中均有大量细胞良好生长,胶原海绵外观变得挺拔、透明、有韧性.结论:新生牛跟腱胶原蛋白海绵,对Vero细胞、天祝白牦牛胚胎皮肤原代细胞和岷县黑紫羔羊睾丸原代细胞无毒性,3种细胞均能在其上良好生长,但在体内是否会引起免疫排斥反应,还有待进一步研究.新生牛跟腱有望成为医用胶原蛋白海绵产品新的原材料. 目的:採用新生牛跟腱製備生物醫用膠原蛋白海綿,通過分彆接種Vero細胞、天祝白牦牛胚胎皮膚原代細胞和岷縣黑紫羔羊睪汍原代細胞至膠原蛋白海綿組織支架上,觀察新生牛跟腱膠原蛋白海綿與3種細胞的生物相容性.方法:實驗于2006-02/05在西北民族大學生命科學與工程學院生物工程與技術國傢民委重點實驗室完成.①用新生牛跟腱經冰醋痠、胃蛋白酶等消化,經鹽析、透析及凍榦等處理後,製備成膠原蛋白海綿.②在六孔闆中,將Vero細胞、天祝白牦牛胚胎皮膚原代細胞和岷縣黑紫羔羊睪汍原代細胞分彆接種于經紫外線、臭氧滅菌後的膠原蛋白海綿上,經37℃體積分數為0.05的CO2恆溫培養;併用另一組細胞在凱氏瓶中培養作對照實驗.用奧林帕斯倒置相差顯微鏡及JVC攝像繫統觀察、拍攝與記錄細胞生長情況,併于培養11d,用攷馬斯亮藍和囌木精-伊紅染色,證實相差顯微鏡觀察的結果.結果:①膠原蛋白海綿製備結果:用新生牛跟腱製備得到具有一定孔隙度的膠原蛋白海綿,經紫外線、臭氧滅菌後可進行細胞培養.②3種細胞在膠原蛋白海綿上和六孔闆底的生長情況:3種細胞接種後5 h,在膠原蛋白海綿週圍的六孔闆孔底可看到Vero細胞已貼壁、伸展,箇彆細胞有分裂現象,在膠原蛋白海綿錶麵,隱約可見圓形細胞排列.Vero細胞和天祝白牦牛胚胎皮膚原代f2細胞接種72 h、岷縣黑裘皮羔羊睪汍原代f2細胞接種48 h時,孔底細胞已經鋪滿單層,但與對照孔比較,生長速度較慢.②3種細胞用攷馬斯亮藍細胞骨架染色和囌木精-伊紅染色的結果:培養到第11天,3種來自不同動物、不同組織的細胞接種的膠原蛋白海綿支架孔中均有大量細胞良好生長,膠原海綿外觀變得挺拔、透明、有韌性.結論:新生牛跟腱膠原蛋白海綿,對Vero細胞、天祝白牦牛胚胎皮膚原代細胞和岷縣黑紫羔羊睪汍原代細胞無毒性,3種細胞均能在其上良好生長,但在體內是否會引起免疫排斥反應,還有待進一步研究.新生牛跟腱有望成為醫用膠原蛋白海綿產品新的原材料.
목적:채용신생우근건제비생물의용효원단백해면,통과분별접충Vero세포、천축백모우배태피부원대세포화민현흑자고양고환원대세포지효원단백해면조직지가상,관찰신생우근건효원단백해면여3충세포적생물상용성.방법:실험우2006-02/05재서북민족대학생명과학여공정학원생물공정여기술국가민위중점실험실완성.①용신생우근건경빙작산、위단백매등소화,경염석、투석급동간등처리후,제비성효원단백해면.②재륙공판중,장Vero세포、천축백모우배태피부원대세포화민현흑자고양고환원대세포분별접충우경자외선、취양멸균후적효원단백해면상,경37℃체적분수위0.05적CO2항온배양;병용령일조세포재개씨병중배양작대조실험.용오림파사도치상차현미경급JVC섭상계통관찰、박섭여기록세포생장정황,병우배양11d,용고마사량람화소목정-이홍염색,증실상차현미경관찰적결과.결과:①효원단백해면제비결과:용신생우근건제비득도구유일정공극도적효원단백해면,경자외선、취양멸균후가진행세포배양.②3충세포재효원단백해면상화륙공판저적생장정황:3충세포접충후5 h,재효원단백해면주위적륙공판공저가간도Vero세포이첩벽、신전,개별세포유분렬현상,재효원단백해면표면,은약가견원형세포배렬.Vero세포화천축백모우배태피부원대f2세포접충72 h、민현흑구피고양고환원대f2세포접충48 h시,공저세포이경포만단층,단여대조공비교,생장속도교만.②3충세포용고마사량람세포골가염색화소목정-이홍염색적결과:배양도제11천,3충래자불동동물、불동조직적세포접충적효원단백해면지가공중균유대량세포량호생장,효원해면외관변득정발、투명、유인성.결론:신생우근건효원단백해면,대Vero세포、천축백모우배태피부원대세포화민현흑자고양고환원대세포무독성,3충세포균능재기상량호생장,단재체내시부회인기면역배척반응,환유대진일보연구.신생우근건유망성위의용효원단백해면산품신적원재료.