蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2008年
2期
250-256
,共7页
薛仁宇%曹广力%王崇龙%刘波%沈卫德%贡成良
薛仁宇%曹廣力%王崇龍%劉波%瀋衛德%貢成良
설인우%조엄력%왕숭룡%류파%침위덕%공성량
RNA干扰%转基因%家蚕核型多角体病毒%家蚕细胞%ie-1基因%lef-1基因
RNA榦擾%轉基因%傢蠶覈型多角體病毒%傢蠶細胞%ie-1基因%lef-1基因
RNA간우%전기인%가잠핵형다각체병독%가잠세포%ie-1기인%lef-1기인
通过RNAi介导可以抑制病毒增殖,将相应的RNAi元件通过转基因转入宿主有可能使宿主对病毒产生一定的抗性.根据家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因组中的病毒复制必需基因ie-1、lef-1设计相应的RNA干扰区段,并构建相应的转基因载体转入家蚕BmN细胞中,瞬时表达结果显示转染了转基因RNAi载体的BmN细胞均对BmNPV有一定的抑制作用.IE dsRNA在病毒滴度为10-4时有抑制作用,在病毒滴度为10-5时有比较好的作用;LEF dsRNA则在病毒滴度为10-5时有抑制作用,在病毒滴度为10-6时有较好的抑制作用.通过转基因及G418筛选后,转基因IE dsRNA细胞在病毒滴度为10-4显示出一定的抑制作用,在病毒滴度为10-5表现了明显的抑制作用;而转基因LEF dsRNA细胞在病毒滴度为10-5有一定的抑制作用,但只维持了一个时段.
通過RNAi介導可以抑製病毒增殖,將相應的RNAi元件通過轉基因轉入宿主有可能使宿主對病毒產生一定的抗性.根據傢蠶覈型多角體病毒(BmNPV)基因組中的病毒複製必需基因ie-1、lef-1設計相應的RNA榦擾區段,併構建相應的轉基因載體轉入傢蠶BmN細胞中,瞬時錶達結果顯示轉染瞭轉基因RNAi載體的BmN細胞均對BmNPV有一定的抑製作用.IE dsRNA在病毒滴度為10-4時有抑製作用,在病毒滴度為10-5時有比較好的作用;LEF dsRNA則在病毒滴度為10-5時有抑製作用,在病毒滴度為10-6時有較好的抑製作用.通過轉基因及G418篩選後,轉基因IE dsRNA細胞在病毒滴度為10-4顯示齣一定的抑製作用,在病毒滴度為10-5錶現瞭明顯的抑製作用;而轉基因LEF dsRNA細胞在病毒滴度為10-5有一定的抑製作用,但隻維持瞭一箇時段.
통과RNAi개도가이억제병독증식,장상응적RNAi원건통과전기인전입숙주유가능사숙주대병독산생일정적항성.근거가잠핵형다각체병독(BmNPV)기인조중적병독복제필수기인ie-1、lef-1설계상응적RNA간우구단,병구건상응적전기인재체전입가잠BmN세포중,순시표체결과현시전염료전기인RNAi재체적BmN세포균대BmNPV유일정적억제작용.IE dsRNA재병독적도위10-4시유억제작용,재병독적도위10-5시유비교호적작용;LEF dsRNA칙재병독적도위10-5시유억제작용,재병독적도위10-6시유교호적억제작용.통과전기인급G418사선후,전기인IE dsRNA세포재병독적도위10-4현시출일정적억제작용,재병독적도위10-5표현료명현적억제작용;이전기인LEF dsRNA세포재병독적도위10-5유일정적억제작용,단지유지료일개시단.
