第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2008年
17期
1641-1643
,共3页
吴素香%马骢%郭建巍%黎卫平%孔路科%魏杰
吳素香%馬驄%郭建巍%黎衛平%孔路科%魏傑
오소향%마총%곽건외%려위평%공로과%위걸
生存素%生存素抗体%酶联免疫吸附实验%重组融合蛋白
生存素%生存素抗體%酶聯免疫吸附實驗%重組融閤蛋白
생존소%생존소항체%매련면역흡부실험%중조융합단백
目的 实现重组survivin在大肠杆菌中的高效、可溶性表达,检测健康人和肿瘤患者血清中anti-survivin并探讨其在肿瘤早期诊断中的应用价值.方法 重组PET32a-survivin质粒转化BL21感受态细胞,IPTG诱导表达8 h后对表达产物行溶菌酶处理、冻融及超声处理,SDS-PAGE及Western blot鉴定后用镍离子金属螯合层析柱纯化.建立基于重组融合蛋白的survivin特异性抗体的检测方法,对300份健康血清、144份肿瘤血清anti-survivin进行了检测,并将anti-sur-vivin与肝癌、肠癌、胰腺癌、卵巢癌患者中AFP、CEA、CA199、CA125等肿瘤标志物进行了联合分析.结果 重组survivin融合蛋白在BL21中获得了高效、可溶性表达,表达量约占菌体总蛋白的30%.建立了检测survivin抗体的间接ELISA方法,anti-survivin在不同的肿瘤血清中均有表达,阳性率各不相同.结论 成功的实现了survivin蛋白在大肠杆菌中的高效、可溶性表达;结果提示在肿瘤的辅助诊断中,anti-survivin与现有的肿瘤标志物CA199、CEA、CA-199和CA-125联合检测,可以互相补充其不足,提高肿瘤的诊断率.
目的 實現重組survivin在大腸桿菌中的高效、可溶性錶達,檢測健康人和腫瘤患者血清中anti-survivin併探討其在腫瘤早期診斷中的應用價值.方法 重組PET32a-survivin質粒轉化BL21感受態細胞,IPTG誘導錶達8 h後對錶達產物行溶菌酶處理、凍融及超聲處理,SDS-PAGE及Western blot鑒定後用鎳離子金屬螯閤層析柱純化.建立基于重組融閤蛋白的survivin特異性抗體的檢測方法,對300份健康血清、144份腫瘤血清anti-survivin進行瞭檢測,併將anti-sur-vivin與肝癌、腸癌、胰腺癌、卵巢癌患者中AFP、CEA、CA199、CA125等腫瘤標誌物進行瞭聯閤分析.結果 重組survivin融閤蛋白在BL21中穫得瞭高效、可溶性錶達,錶達量約佔菌體總蛋白的30%.建立瞭檢測survivin抗體的間接ELISA方法,anti-survivin在不同的腫瘤血清中均有錶達,暘性率各不相同.結論 成功的實現瞭survivin蛋白在大腸桿菌中的高效、可溶性錶達;結果提示在腫瘤的輔助診斷中,anti-survivin與現有的腫瘤標誌物CA199、CEA、CA-199和CA-125聯閤檢測,可以互相補充其不足,提高腫瘤的診斷率.
목적 실현중조survivin재대장간균중적고효、가용성표체,검측건강인화종류환자혈청중anti-survivin병탐토기재종류조기진단중적응용개치.방법 중조PET32a-survivin질립전화BL21감수태세포,IPTG유도표체8 h후대표체산물행용균매처리、동융급초성처리,SDS-PAGE급Western blot감정후용얼리자금속오합층석주순화.건립기우중조융합단백적survivin특이성항체적검측방법,대300빈건강혈청、144빈종류혈청anti-survivin진행료검측,병장anti-sur-vivin여간암、장암、이선암、란소암환자중AFP、CEA、CA199、CA125등종류표지물진행료연합분석.결과 중조survivin융합단백재BL21중획득료고효、가용성표체,표체량약점균체총단백적30%.건립료검측survivin항체적간접ELISA방법,anti-survivin재불동적종류혈청중균유표체,양성솔각불상동.결론 성공적실현료survivin단백재대장간균중적고효、가용성표체;결과제시재종류적보조진단중,anti-survivin여현유적종류표지물CA199、CEA、CA-199화CA-125연합검측,가이호상보충기불족,제고종류적진단솔.
