南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2009年
1期
31-35
,共5页
杨丽娜%刘捷%庄智敏%章镇%周蓓蓓%陶建敏
楊麗娜%劉捷%莊智敏%章鎮%週蓓蓓%陶建敏
양려나%류첩%장지민%장진%주배배%도건민
'美人指'%葡萄%Barnase基因%GUS组织化学染色%PCR检测
'美人指'%葡萄%Barnase基因%GUS組織化學染色%PCR檢測
'미인지'%포도%Barnase기인%GUS조직화학염색%PCR검측
以'美人指'葡萄离体叶片及叶柄为农杆菌介导转化Barnase基因的受体,对农杆菌侵染时间、共培养时间、预培养时间、卡那霉素选择压以及头孢霉素浓度等因素进行了研究.结果表明:最佳的农杆菌介导'美人指'葡萄遗传转化体系为农杆菌侵染4 min,共培养3 d,预培养3 d,卡那霉素选择压3.0 mg·L-1,头孢霉素质量浓度250 mg·L-1.采用此体系对'美人指'葡萄进行转化,共获得了12株抗性苗,农杆菌感染后的不定芽再生率为1.78%.利用GUS组织化学染色、PCR扩增的方法进行检测,结果表明,其中只有2株GUS染色呈阳性,阳性率为16.67%;有3株通过了PCR检测,初步证实Barnase基因已经整合进入'美人指'葡萄基冈组中.
以'美人指'葡萄離體葉片及葉柄為農桿菌介導轉化Barnase基因的受體,對農桿菌侵染時間、共培養時間、預培養時間、卡那黴素選擇壓以及頭孢黴素濃度等因素進行瞭研究.結果錶明:最佳的農桿菌介導'美人指'葡萄遺傳轉化體繫為農桿菌侵染4 min,共培養3 d,預培養3 d,卡那黴素選擇壓3.0 mg·L-1,頭孢黴素質量濃度250 mg·L-1.採用此體繫對'美人指'葡萄進行轉化,共穫得瞭12株抗性苗,農桿菌感染後的不定芽再生率為1.78%.利用GUS組織化學染色、PCR擴增的方法進行檢測,結果錶明,其中隻有2株GUS染色呈暘性,暘性率為16.67%;有3株通過瞭PCR檢測,初步證實Barnase基因已經整閤進入'美人指'葡萄基岡組中.
이'미인지'포도리체협편급협병위농간균개도전화Barnase기인적수체,대농간균침염시간、공배양시간、예배양시간、잡나매소선택압이급두포매소농도등인소진행료연구.결과표명:최가적농간균개도'미인지'포도유전전화체계위농간균침염4 min,공배양3 d,예배양3 d,잡나매소선택압3.0 mg·L-1,두포매소질량농도250 mg·L-1.채용차체계대'미인지'포도진행전화,공획득료12주항성묘,농간균감염후적불정아재생솔위1.78%.이용GUS조직화학염색、PCR확증적방법진행검측,결과표명,기중지유2주GUS염색정양성,양성솔위16.67%;유3주통과료PCR검측,초보증실Barnase기인이경정합진입'미인지'포도기강조중.
