CAJ | 학술논문

目的:利用DNA指纹图谱技术——变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)分析我国育龄期及绝经期健康女性阴道菌群多样性,为了解各种下生殖道感染疾病状态下的微生态环境奠定基础,为研制适合恢复中国女性正常阴道微生态环境的微生态制剂提供依据.方法:选取2009年10月至2010年1月在北京大学第一医院妇产科门诊常规体检的健康女性(其中育龄期30例、绝经后30例)为研究对象.采集阴道分泌物,提取细菌总DNA,采用通用引物对细菌16S rDNA基因的V3区进行扩增,将PCR产物进行变性梯度凝胶电泳,通过对DGGE特征条带切胶回收并进行克隆测序,利用GenBank中的Blast与已知序列比对,鉴定细菌菌种,分析不同生理状态下阴道菌群的多样性.结果:(1)我国育龄期健康女性阴道常见菌种为:卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、惰性乳杆菌(Lactobacillus iners)和加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri),其中惰性乳杆菌是以往通过传统培养方法尚未认识到的阴道优势菌种.(2)绝经期健康女性阴道菌种与育龄期不同且复杂,常见菌种有:惰性乳杆菌、卷曲乳杆菌、大肠杆菌(Escherichia coli、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、解没食子酸链球菌(Streptococcus gallolyticus)、韦荣球菌属(Veillonella sp.)、中间链球菌(Streptococcus intermedius)、咽颊炎链球菌(Streptococcus anginosus)、普雷沃氏菌属(Prevotella sp.)、气球菌(Anaerococcus lactolyticus)和脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis).结论:通过DGGE分析发现我国育龄期健康女性阴道常见优势菌种为:卷曲乳杆菌、惰性乳杆菌、加氏乳杆菌；绝经期健康女性阴道常见优势菌种为:惰性乳杆菌、卷曲乳杆菌、大肠杆菌、链球菌属、普雷沃菌属、脆弱拟杆菌以及产乳酸的韦荣球菌、气球菌属,并首次发现在不同生理状态下惰性乳杆菌均是阴道优势菌种之一. 目的:利用DNA指紋圖譜技術——變性梯度凝膠電泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)分析我國育齡期及絕經期健康女性陰道菌群多樣性,為瞭解各種下生殖道感染疾病狀態下的微生態環境奠定基礎,為研製適閤恢複中國女性正常陰道微生態環境的微生態製劑提供依據.方法:選取2009年10月至2010年1月在北京大學第一醫院婦產科門診常規體檢的健康女性(其中育齡期30例、絕經後30例)為研究對象.採集陰道分泌物,提取細菌總DNA,採用通用引物對細菌16S rDNA基因的V3區進行擴增,將PCR產物進行變性梯度凝膠電泳,通過對DGGE特徵條帶切膠迴收併進行剋隆測序,利用GenBank中的Blast與已知序列比對,鑒定細菌菌種,分析不同生理狀態下陰道菌群的多樣性.結果:(1)我國育齡期健康女性陰道常見菌種為:捲麯乳桿菌(Lactobacillus crispatus)、惰性乳桿菌(Lactobacillus iners)和加氏乳桿菌(Lactobacillus gasseri),其中惰性乳桿菌是以往通過傳統培養方法尚未認識到的陰道優勢菌種.(2)絕經期健康女性陰道菌種與育齡期不同且複雜,常見菌種有:惰性乳桿菌、捲麯乳桿菌、大腸桿菌(Escherichia coli、無乳鏈毬菌(Streptococcus agalactiae)、解沒食子痠鏈毬菌(Streptococcus gallolyticus)、韋榮毬菌屬(Veillonella sp.)、中間鏈毬菌(Streptococcus intermedius)、嚥頰炎鏈毬菌(Streptococcus anginosus)、普雷沃氏菌屬(Prevotella sp.)、氣毬菌(Anaerococcus lactolyticus)和脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis).結論:通過DGGE分析髮現我國育齡期健康女性陰道常見優勢菌種為:捲麯乳桿菌、惰性乳桿菌、加氏乳桿菌；絕經期健康女性陰道常見優勢菌種為:惰性乳桿菌、捲麯乳桿菌、大腸桿菌、鏈毬菌屬、普雷沃菌屬、脆弱擬桿菌以及產乳痠的韋榮毬菌、氣毬菌屬,併首次髮現在不同生理狀態下惰性乳桿菌均是陰道優勢菌種之一.
목적:이용DNA지문도보기술——변성제도응효전영(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)분석아국육령기급절경기건강녀성음도균군다양성,위료해각충하생식도감염질병상태하적미생태배경전정기출,위연제괄합회복중국녀성정상음도미생태배경적미생태제제제공의거.방법:선취2009년10월지2010년1월재북경대학제일의원부산과문진상규체검적건강녀성(기중육령기30례、절경후30례)위연구대상.채집음도분비물,제취세균총DNA,채용통용인물대세균16S rDNA기인적V3구진행확증,장PCR산물진행변성제도응효전영,통과대DGGE특정조대절효회수병진행극륭측서,이용GenBank중적Blast여이지서렬비대,감정세균균충,분석불동생리상태하음도균군적다양성.결과:(1)아국육령기건강녀성음도상견균충위:권곡유간균(Lactobacillus crispatus)、타성유간균(Lactobacillus iners)화가씨유간균(Lactobacillus gasseri),기중타성유간균시이왕통과전통배양방법상미인식도적음도우세균충.(2)절경기건강녀성음도균충여육령기불동차복잡,상견균충유:타성유간균、권곡유간균、대장간균(Escherichia coli、무유련구균(Streptococcus agalactiae)、해몰식자산련구균(Streptococcus gallolyticus)、위영구균속(Veillonella sp.)、중간련구균(Streptococcus intermedius)、인협염련구균(Streptococcus anginosus)、보뢰옥씨균속(Prevotella sp.)、기구균(Anaerococcus lactolyticus)화취약의간균(Bacteroides fragilis).결론:통과DGGE분석발현아국육령기건강녀성음도상견우세균충위:권곡유간균、타성유간균、가씨유간균；절경기건강녀성음도상견우세균충위:타성유간균、권곡유간균、대장간균、련구균속、보뢰옥균속、취약의간균이급산유산적위영구균、기구균속,병수차발현재불동생리상태하타성유간균균시음도우세균충지일.