中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
7期
1326-1330,1334
,共6页
朱俊峰%黄小荣%冯宇鹏%周俊宜
硃俊峰%黃小榮%馮宇鵬%週俊宜
주준봉%황소영%풍우붕%주준의
端粒酶RNA%人支气管上皮细胞%RNA干扰%N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍
耑粒酶RNA%人支氣管上皮細胞%RNA榦擾%N-甲基-N'-硝基-N-亞硝基胍
단립매RNA%인지기관상피세포%RNA간우%N-갑기-N'-초기-N-아초기고
目的:建立N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的人端粒酶RNA组分(telomerase RNA component,TERC)缺陷的人支气管上皮细胞株(16HBE)恶性转化细胞模型.方法:将靶向TERC基因的shRNA干扰质粒载体转染16HBE细胞,G418抗性克隆筛选得到稳定转染的16HBE-1细胞,RT-PCR检测16HBE-1细胞TERC mRNA的干扰效率;用1 mg/L MNNG对16HBE-1细胞进行隔代染毒,每次染毒1 h;直到染毒27次转化灶的出现.分离扩增转化灶细胞并命名为16HBE-T,用软琼脂克隆形成实验和裸鼠成瘤实验鉴定细胞的转化程度.结果:从转化灶分离培养的细胞能在软琼脂中生长,且转化细胞能在裸鼠体内成瘤,HE染色后光镜下显示为鳞癌.结论:成功建立MNNG诱导的TERC基因缺陷的16HBE细胞恶性转化模型.
目的:建立N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍(N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)誘導的人耑粒酶RNA組分(telomerase RNA component,TERC)缺陷的人支氣管上皮細胞株(16HBE)噁性轉化細胞模型.方法:將靶嚮TERC基因的shRNA榦擾質粒載體轉染16HBE細胞,G418抗性剋隆篩選得到穩定轉染的16HBE-1細胞,RT-PCR檢測16HBE-1細胞TERC mRNA的榦擾效率;用1 mg/L MNNG對16HBE-1細胞進行隔代染毒,每次染毒1 h;直到染毒27次轉化竈的齣現.分離擴增轉化竈細胞併命名為16HBE-T,用軟瓊脂剋隆形成實驗和裸鼠成瘤實驗鑒定細胞的轉化程度.結果:從轉化竈分離培養的細胞能在軟瓊脂中生長,且轉化細胞能在裸鼠體內成瘤,HE染色後光鏡下顯示為鱗癌.結論:成功建立MNNG誘導的TERC基因缺陷的16HBE細胞噁性轉化模型.
목적:건립N-갑기-N-초기-N-아초기고(N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)유도적인단립매RNA조분(telomerase RNA component,TERC)결함적인지기관상피세포주(16HBE)악성전화세포모형.방법:장파향TERC기인적shRNA간우질립재체전염16HBE세포,G418항성극륭사선득도은정전염적16HBE-1세포,RT-PCR검측16HBE-1세포TERC mRNA적간우효솔;용1 mg/L MNNG대16HBE-1세포진행격대염독,매차염독1 h;직도염독27차전화조적출현.분리확증전화조세포병명명위16HBE-T,용연경지극륭형성실험화라서성류실험감정세포적전화정도.결과:종전화조분리배양적세포능재연경지중생장,차전화세포능재라서체내성류,HE염색후광경하현시위린암.결론:성공건립MNNG유도적TERC기인결함적16HBE세포악성전화모형.
