中华显微外科杂志
中華顯微外科雜誌
중화현미외과잡지
Chinese Journal of Microsurgery
2002年
3期
197-200
,共4页
许旺细胞%成纤维细胞%神经纤维%双酶消化法
許旺細胞%成纖維細胞%神經纖維%雙酶消化法
허왕세포%성섬유세포%신경섬유%쌍매소화법
目的探讨从成年大白鼠坐骨神经中培养出纯的许旺细胞的方法.方法采用以下几种培养方法:(1)常规方法进行大白鼠坐骨神经组织块培养(A法).(2)应用常规的胰酶消化方法进行坐骨神经细胞培养(B法).(3)是经过改良的细胞培养方法(C法).实验组:从坐骨神经束抽取单条神经纤维,剪碎后用高浓度的双酶(0.5%胰蛋白酶和0.06%胶元蛋白酶)经80～90min的消化后进行细胞培养.对照组:把抽取神经纤维后剩余的神经束膜和神经鞘膜,常规胰酶消化后进行细胞培养.用S100抗体和成纤维细胞抗体对培养物进行鉴定,并用MTT测定和H3胸腺嘧啶核苷检测细胞的增殖能力.结果在A,B法的培养物中,虽然有少量许旺细胞,但同时出现大量的成纤维细胞;用C法分离培养的细胞经鉴定证实全为许旺细胞,MTT和H3测定证实生长良好,而对照组的培养物均全部为成纤维细胞.结论在C法中使用的抽取单条神经纤维和高浓度双酶长时间消化技术,能彻底清除成纤维细胞,从而保持许旺细胞的正常生长繁殖.
目的探討從成年大白鼠坐骨神經中培養齣純的許旺細胞的方法.方法採用以下幾種培養方法:(1)常規方法進行大白鼠坐骨神經組織塊培養(A法).(2)應用常規的胰酶消化方法進行坐骨神經細胞培養(B法).(3)是經過改良的細胞培養方法(C法).實驗組:從坐骨神經束抽取單條神經纖維,剪碎後用高濃度的雙酶(0.5%胰蛋白酶和0.06%膠元蛋白酶)經80～90min的消化後進行細胞培養.對照組:把抽取神經纖維後剩餘的神經束膜和神經鞘膜,常規胰酶消化後進行細胞培養.用S100抗體和成纖維細胞抗體對培養物進行鑒定,併用MTT測定和H3胸腺嘧啶覈苷檢測細胞的增殖能力.結果在A,B法的培養物中,雖然有少量許旺細胞,但同時齣現大量的成纖維細胞;用C法分離培養的細胞經鑒定證實全為許旺細胞,MTT和H3測定證實生長良好,而對照組的培養物均全部為成纖維細胞.結論在C法中使用的抽取單條神經纖維和高濃度雙酶長時間消化技術,能徹底清除成纖維細胞,從而保持許旺細胞的正常生長繁殖.
목적탐토종성년대백서좌골신경중배양출순적허왕세포적방법.방법채용이하궤충배양방법:(1)상규방법진행대백서좌골신경조직괴배양(A법).(2)응용상규적이매소화방법진행좌골신경세포배양(B법).(3)시경과개량적세포배양방법(C법).실험조:종좌골신경속추취단조신경섬유,전쇄후용고농도적쌍매(0.5%이단백매화0.06%효원단백매)경80～90min적소화후진행세포배양.대조조:파추취신경섬유후잉여적신경속막화신경초막,상규이매소화후진행세포배양.용S100항체화성섬유세포항체대배양물진행감정,병용MTT측정화H3흉선밀정핵감검측세포적증식능력.결과재A,B법적배양물중,수연유소량허왕세포,단동시출현대량적성섬유세포;용C법분리배양적세포경감정증실전위허왕세포,MTT화H3측정증실생장량호,이대조조적배양물균전부위성섬유세포.결론재C법중사용적추취단조신경섬유화고농도쌍매장시간소화기술,능철저청제성섬유세포,종이보지허왕세포적정상생장번식.
