CAJ | 학술논문

目的探索小鼠骨髓来源的单个核细胞向肝细胞分化的诱导条件.方法通过密度梯度离心的方法获得小鼠骨髓来源的单个核细胞;在含有100 g/L新生牛血清的IMDM培养液中添加细胞因子HGF 20 ng/ml、FGF-4 10ng/ml和OSM10ng/ml,诱导骨髓来源的单个核细胞向肝细胞分化.结果小鼠骨髓单个核细胞在3种细胞因子的诱导下,随着时间的延长,体积逐渐增大、形态上向上皮样细胞转变,胞浆丰富,出现双核或多核细胞;半定量RT-PCR的结果显示,甲胎蛋白(AFP)和细胞角蛋白19(CK19)的表达量在诱导初期首先增加,在诱导后期逐渐减少,而白蛋白(ALB)、细胞角蛋白18(CK18)以及酪胺酸胺基转移酶(TAT)的表达与诱导时间呈线性关系;免疫荧光检测诱导3周后的细胞,AFP、CK19、CK18和ALB均为阳性表达;诱导3周的细胞PAS糖原合成反应呈阳性,说明已经具备糖元合成和储存这一肝细胞的特征性功能.结论培养液中添加3种细胞因子(HGF、FGF-4和OSM)组合可以诱导小鼠单个核细胞向肝细胞分化.
목적탐색소서골수래원적단개핵세포향간세포분화적유도조건.방법통과밀도제도리심적방법획득소서골수래원적단개핵세포;재함유100 g/L신생우혈청적IMDM배양액중첨가세포인자HGF 20 ng/ml、FGF-4 10ng/ml화OSM10ng/ml,유도골수래원적단개핵세포향간세포분화.결과소서골수단개핵세포재3충세포인자적유도하,수착시간적연장,체적축점증대、형태상향상피양세포전변,포장봉부,출현쌍핵혹다핵세포;반정량RT-PCR적결과현시,갑태단백(AFP)화세포각단백19(CK19)적표체량재유도초기수선증가,재유도후기축점감소,이백단백(ALB)、세포각단백18(CK18)이급락알산알기전이매(TAT)적표체여유도시간정선성관계;면역형광검측유도3주후적세포,AFP、CK19、CK18화ALB균위양성표체;유도3주적세포PAS당원합성반응정양성,설명이경구비당원합성화저존저일간세포적특정성공능.결론배양액중첨가3충세포인자(HGF、FGF-4화OSM)조합가이유도소서단개핵세포향간세포분화.