CAJ | 학술논문

myostatin基因是肌肉生长和发育的关键负调控因子之一,该基因突变或失活的物种都呈现肌肉增大的双肌表型,暗示在家畜中使该基因失活可以增加其产肉量.为了进一步揭示myostatin在山羊胎儿成纤维细胞中的生物学功能以及制备可有效失活myostatin基因的工具,将筛选的myostatin基因潜在RNA干扰靶位点连接到慢病毒干扰载体的转移质粒中,构建慢病毒介导的RNA干扰载体,验证其干扰效果.结果表明,干扰序列与转移质粒连接正确,成功构建myostatin基因慢病毒干扰载体,慢病毒三质粒共转293T细胞,获得的慢病毒颗粒可高效转染山羊胎儿成纤维细胞,Real-time PCR检测发现慢病毒干扰载体Lv322有效减少山羊胎儿成纤维细胞中myostatin基因mRNA 75％的表达(P＜0.01),Western blotting检测显示myostatin蛋白则有效降低了94％(P＜0.01).本试验为研究myostatin基因的功能及制备失活转基因动物提供有效工具以及理论基础.
myostatin기인시기육생장화발육적관건부조공인자지일,해기인돌변혹실활적물충도정현기육증대적쌍기표형,암시재가축중사해기인실활가이증가기산육량.위료진일보게시myostatin재산양태인성섬유세포중적생물학공능이급제비가유효실활myostatin기인적공구,장사선적myostatin기인잠재RNA간우파위점련접도만병독간우재체적전이질립중,구건만병독개도적RNA간우재체,험증기간우효과.결과표명,간우서렬여전이질립련접정학,성공구건myostatin기인만병독간우재체,만병독삼질립공전293T세포,획득적만병독과립가고효전염산양태인성섬유세포,Real-time PCR검측발현만병독간우재체Lv322유효감소산양태인성섬유세포중myostatin기인mRNA 75％적표체(P＜0.01),Western blotting검측현시myostatin단백칙유효강저료94％(P＜0.01).본시험위연구myostatin기인적공능급제비실활전기인동물제공유효공구이급이론기출.