重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2012年
3期
232-235
,共4页
杨可%杨震%汪德强%雷寒%周建中
楊可%楊震%汪德彊%雷寒%週建中
양가%양진%왕덕강%뢰한%주건중
葡激酶%表达纯化%体外活性
葡激酶%錶達純化%體外活性
포격매%표체순화%체외활성
目的:构建葡激酶( Staphylokinase,SAK)基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达SAK蛋白质,纯化并初步鉴定其生物学活性.方法:基于生物信息学方法分析优化基因序列,使用基因合成技术合成SAK基因,转化感受态大肠杆菌B834菌株,使在其中表达,利用离子交换柱,分子筛(Superdex 75)等进行分离纯化,应用纤维蛋白平板溶圈法测定评价其生物活性.结果:SAK在大肠杆菌中以可溶上清的方式高效表达,利用离子交换柱和分子筛等纯化效果良好,纯度达95％,体外实验显示其纤溶活性与尿激酶标准品相当.结论:应用全基因合成经过优化的基因可在大肠杆菌系统中高效上清表达具有较高纤溶活性的SAK.
目的:構建葡激酶( Staphylokinase,SAK)基因的原覈錶達質粒,在大腸桿菌中錶達SAK蛋白質,純化併初步鑒定其生物學活性.方法:基于生物信息學方法分析優化基因序列,使用基因閤成技術閤成SAK基因,轉化感受態大腸桿菌B834菌株,使在其中錶達,利用離子交換柱,分子篩(Superdex 75)等進行分離純化,應用纖維蛋白平闆溶圈法測定評價其生物活性.結果:SAK在大腸桿菌中以可溶上清的方式高效錶達,利用離子交換柱和分子篩等純化效果良好,純度達95％,體外實驗顯示其纖溶活性與尿激酶標準品相噹.結論:應用全基因閤成經過優化的基因可在大腸桿菌繫統中高效上清錶達具有較高纖溶活性的SAK.
목적:구건포격매( Staphylokinase,SAK)기인적원핵표체질립,재대장간균중표체SAK단백질,순화병초보감정기생물학활성.방법:기우생물신식학방법분석우화기인서렬,사용기인합성기술합성SAK기인,전화감수태대장간균B834균주,사재기중표체,이용리자교환주,분자사(Superdex 75)등진행분리순화,응용섬유단백평판용권법측정평개기생물활성.결과:SAK재대장간균중이가용상청적방식고효표체,이용리자교환주화분자사등순화효과량호,순도체95％,체외실험현시기섬용활성여뇨격매표준품상당.결론:응용전기인합성경과우화적기인가재대장간균계통중고효상청표체구유교고섬용활성적SAK.
