药学学报
藥學學報
약학학보
ACTA PHARMACEUTICA SINICA
2003年
1期
10-14
,共5页
田辉凯%张红梅%姚小皓%李学军
田輝凱%張紅梅%姚小皓%李學軍
전휘개%장홍매%요소호%리학군
细胞凋亡%无细胞体系%非洲爪蟾卵%细胞色素C%z-VAD-fmk
細胞凋亡%無細胞體繫%非洲爪蟾卵%細胞色素C%z-VAD-fmk
세포조망%무세포체계%비주조섬란%세포색소C%z-VAD-fmk
目的建立一种简便、高效的无细胞凋亡体系,探讨外源细胞核在其中的凋亡过程及z-VAD-fmk对其的抑制作用.方法超速离心制备非洲爪蟾卵无细胞体系,用细胞色素C激活为凋亡体系.应用荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳、ApoAlert Caspase-3 Colorimetric Assay等方法检测外源细胞核在无细胞凋亡体系中的凋亡过程及z-VAD-fmk的抑制作用.结果制备的爪蟾卵无细胞体系可由细胞色素C激活为凋亡体系,外源加入的细胞核呈现典型的形态学变化,总DNA特异降解形成DNA ladder.体系内内源特异核酸酶被激活.z-VAD-fmk可抑制DNA ladder的形成.凋亡特异蛋白酶XCPP32活性明显升高.结论本实验建立的无细胞凋亡体系可以高效的诱导外源细胞核凋亡,重现体内过程.
目的建立一種簡便、高效的無細胞凋亡體繫,探討外源細胞覈在其中的凋亡過程及z-VAD-fmk對其的抑製作用.方法超速離心製備非洲爪蟾卵無細胞體繫,用細胞色素C激活為凋亡體繫.應用熒光顯微鏡、瓊脂糖凝膠電泳、ApoAlert Caspase-3 Colorimetric Assay等方法檢測外源細胞覈在無細胞凋亡體繫中的凋亡過程及z-VAD-fmk的抑製作用.結果製備的爪蟾卵無細胞體繫可由細胞色素C激活為凋亡體繫,外源加入的細胞覈呈現典型的形態學變化,總DNA特異降解形成DNA ladder.體繫內內源特異覈痠酶被激活.z-VAD-fmk可抑製DNA ladder的形成.凋亡特異蛋白酶XCPP32活性明顯升高.結論本實驗建立的無細胞凋亡體繫可以高效的誘導外源細胞覈凋亡,重現體內過程.
목적건립일충간편、고효적무세포조망체계,탐토외원세포핵재기중적조망과정급z-VAD-fmk대기적억제작용.방법초속리심제비비주조섬란무세포체계,용세포색소C격활위조망체계.응용형광현미경、경지당응효전영、ApoAlert Caspase-3 Colorimetric Assay등방법검측외원세포핵재무세포조망체계중적조망과정급z-VAD-fmk적억제작용.결과제비적조섬란무세포체계가유세포색소C격활위조망체계,외원가입적세포핵정현전형적형태학변화,총DNA특이강해형성DNA ladder.체계내내원특이핵산매피격활.z-VAD-fmk가억제DNA ladder적형성.조망특이단백매XCPP32활성명현승고.결론본실험건립적무세포조망체계가이고효적유도외원세포핵조망,중현체내과정.
