分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2011年
4期
438-442
,共5页
王自布%齐军仓%李卫华%曹连莆%银永安%石培春
王自佈%齊軍倉%李衛華%曹連莆%銀永安%石培春
왕자포%제군창%리위화%조련보%은영안%석배춘
SBE2b基因%RNAi%植物表达载体
SBE2b基因%RNAi%植物錶達載體
SBE2b기인%RNAi%식물표체재체
构建sbe2b的RNAi表达载体,并对其转化烟草,检测其对直链淀粉合成的影响.利用网络数据库http://jura.wi.mit.edu/bioc/siRNAext/,确定小麦胚乳淀粉分支酶sbe2b的部分基因序列作为RNAi的目标序列,通过RT-PCR方法从小麦籽粒胚乳中成功克隆出了小麦胚乳中淀粉分支酶sbe2b基因的部分序列(300 bp)(GenBank No.AY740401),以植物表达载体PZP35S为基础,构建了由组成型启动子35S调控的sbe2b基因的RNAi植物表达载体.实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测其在转基因烟草中的相对表达量,并测定转基因植株中直链淀粉的含量和支链淀粉含量的变化.结果表明:经qRT-PCR证实sbe2b基因的表达量较对照下降,而且支链淀粉含量变化显著,直链淀粉较对照有上升但变化没有达到显著水平.
構建sbe2b的RNAi錶達載體,併對其轉化煙草,檢測其對直鏈澱粉閤成的影響.利用網絡數據庫http://jura.wi.mit.edu/bioc/siRNAext/,確定小麥胚乳澱粉分支酶sbe2b的部分基因序列作為RNAi的目標序列,通過RT-PCR方法從小麥籽粒胚乳中成功剋隆齣瞭小麥胚乳中澱粉分支酶sbe2b基因的部分序列(300 bp)(GenBank No.AY740401),以植物錶達載體PZP35S為基礎,構建瞭由組成型啟動子35S調控的sbe2b基因的RNAi植物錶達載體.實時熒光定量PCR (qRT-PCR)檢測其在轉基因煙草中的相對錶達量,併測定轉基因植株中直鏈澱粉的含量和支鏈澱粉含量的變化.結果錶明:經qRT-PCR證實sbe2b基因的錶達量較對照下降,而且支鏈澱粉含量變化顯著,直鏈澱粉較對照有上升但變化沒有達到顯著水平.
구건sbe2b적RNAi표체재체,병대기전화연초,검측기대직련정분합성적영향.이용망락수거고http://jura.wi.mit.edu/bioc/siRNAext/,학정소맥배유정분분지매sbe2b적부분기인서렬작위RNAi적목표서렬,통과RT-PCR방법종소맥자립배유중성공극륭출료소맥배유중정분분지매sbe2b기인적부분서렬(300 bp)(GenBank No.AY740401),이식물표체재체PZP35S위기출,구건료유조성형계동자35S조공적sbe2b기인적RNAi식물표체재체.실시형광정량PCR (qRT-PCR)검측기재전기인연초중적상대표체량,병측정전기인식주중직련정분적함량화지련정분함량적변화.결과표명:경qRT-PCR증실sbe2b기인적표체량교대조하강,이차지련정분함량변화현저,직련정분교대조유상승단변화몰유체도현저수평.
