河北医学
河北醫學
하북의학
HEBEI MEDICINE
2011年
2期
143-146
,共4页
Apobec3B%真核表达%HBV
Apobec3B%真覈錶達%HBV
Apobec3B%진핵표체%HBV
目的:在真核细胞中表达 Apobec3B,并探讨其在体外对HBV 复制和表达的抑制作用.方法:应用RT-PCR 法从人PBMC 细胞中扩增Apobec3B基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Apobec3B,转染Hep G2 2.2. 15 细胞.Western-blot 鉴定细胞中Apobec3B蛋白的表达.ELISA 法检测细胞培养上清液中HBsAg 和HBeAg水平,RT-PCR 检测HBV DNA 和HBV mRNA 水平.结果:经酶切及测序鉴定pcDNA3.1-Apobec3B成功构建,Apobec3B蛋白可在Hep G22.2. 15 细胞中成功表达.转染pcDNA3.1-Apobec3B重组质粒的Hep G2 2.2. 15 细胞的HBsAg、HBeAg、HBV DNA 及HBV mRNA 水平均明显低于转染空载体组的Hep G2 2.2. 15 细胞.结论:成功在真核细胞中表达Apobec3B,其可明显抑制了Hep G22.2. 15细胞中HBV 的复制与表达,为深入研究Apobec3B抗HBV 的作用机制奠定基础.
目的:在真覈細胞中錶達 Apobec3B,併探討其在體外對HBV 複製和錶達的抑製作用.方法:應用RT-PCR 法從人PBMC 細胞中擴增Apobec3B基因,構建真覈錶達載體pcDNA3.1-Apobec3B,轉染Hep G2 2.2. 15 細胞.Western-blot 鑒定細胞中Apobec3B蛋白的錶達.ELISA 法檢測細胞培養上清液中HBsAg 和HBeAg水平,RT-PCR 檢測HBV DNA 和HBV mRNA 水平.結果:經酶切及測序鑒定pcDNA3.1-Apobec3B成功構建,Apobec3B蛋白可在Hep G22.2. 15 細胞中成功錶達.轉染pcDNA3.1-Apobec3B重組質粒的Hep G2 2.2. 15 細胞的HBsAg、HBeAg、HBV DNA 及HBV mRNA 水平均明顯低于轉染空載體組的Hep G2 2.2. 15 細胞.結論:成功在真覈細胞中錶達Apobec3B,其可明顯抑製瞭Hep G22.2. 15細胞中HBV 的複製與錶達,為深入研究Apobec3B抗HBV 的作用機製奠定基礎.
목적:재진핵세포중표체 Apobec3B,병탐토기재체외대HBV 복제화표체적억제작용.방법:응용RT-PCR 법종인PBMC 세포중확증Apobec3B기인,구건진핵표체재체pcDNA3.1-Apobec3B,전염Hep G2 2.2. 15 세포.Western-blot 감정세포중Apobec3B단백적표체.ELISA 법검측세포배양상청액중HBsAg 화HBeAg수평,RT-PCR 검측HBV DNA 화HBV mRNA 수평.결과:경매절급측서감정pcDNA3.1-Apobec3B성공구건,Apobec3B단백가재Hep G22.2. 15 세포중성공표체.전염pcDNA3.1-Apobec3B중조질립적Hep G2 2.2. 15 세포적HBsAg、HBeAg、HBV DNA 급HBV mRNA 수평균명현저우전염공재체조적Hep G2 2.2. 15 세포.결론:성공재진핵세포중표체Apobec3B,기가명현억제료Hep G22.2. 15세포중HBV 적복제여표체,위심입연구Apobec3B항HBV 적작용궤제전정기출.
