基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2010年
5期
843-848
,共6页
廖东庆%陈发忠%岳田芳%张云光%黄日波%李晓明
廖東慶%陳髮忠%嶽田芳%張雲光%黃日波%李曉明
료동경%진발충%악전방%장운광%황일파%리효명
α-乙酰乳酸脱羧酶%枯草芽孢杆菌%整合表达%同源重组
α-乙酰乳痠脫羧酶%枯草芽孢桿菌%整閤錶達%同源重組
α-을선유산탈최매%고초아포간균%정합표체%동원중조
α-乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中能加快啤酒成熟,有重要的应用价值.本研究将枯草芽孢杆菌启动子P43克降到质粒pUC19-ALDC中的α-乙酰乳酸脱羧酶基因之前,得到重组质粒pUC19-P43-ALDC.重组质粒pUC19-P43-ALDC与质粒pMLK83-BN同源重组,筛选得到枯草芽孢杆菌整合质粒pMLK83-ALDC.用此整合质粒转化枯草芽孢杆菌1A751,挑选出新霉素抗性且无淀粉酶活性的重组菌株.此菌株用LB培养基在37℃、220 r/min摇瓶培养过夜,测得α-乙酰乳酸脱羧酶活力为15.6 U/mL,说明整合的α-乙酰乳酸脱羧酶基因能够在重组菌株中稳定传代和表达.本研究首次在枯草芽孢杆菌中用整合型的方式重组表达了α-乙酰乳酸脱羧酶,提出了一种有潜力的生产α-乙酰乳酸脱羧酶的新方法.
α-乙酰乳痠脫羧酶在啤酒生產中能加快啤酒成熟,有重要的應用價值.本研究將枯草芽孢桿菌啟動子P43剋降到質粒pUC19-ALDC中的α-乙酰乳痠脫羧酶基因之前,得到重組質粒pUC19-P43-ALDC.重組質粒pUC19-P43-ALDC與質粒pMLK83-BN同源重組,篩選得到枯草芽孢桿菌整閤質粒pMLK83-ALDC.用此整閤質粒轉化枯草芽孢桿菌1A751,挑選齣新黴素抗性且無澱粉酶活性的重組菌株.此菌株用LB培養基在37℃、220 r/min搖瓶培養過夜,測得α-乙酰乳痠脫羧酶活力為15.6 U/mL,說明整閤的α-乙酰乳痠脫羧酶基因能夠在重組菌株中穩定傳代和錶達.本研究首次在枯草芽孢桿菌中用整閤型的方式重組錶達瞭α-乙酰乳痠脫羧酶,提齣瞭一種有潛力的生產α-乙酰乳痠脫羧酶的新方法.
α-을선유산탈최매재비주생산중능가쾌비주성숙,유중요적응용개치.본연구장고초아포간균계동자P43극강도질립pUC19-ALDC중적α-을선유산탈최매기인지전,득도중조질립pUC19-P43-ALDC.중조질립pUC19-P43-ALDC여질립pMLK83-BN동원중조,사선득도고초아포간균정합질립pMLK83-ALDC.용차정합질립전화고초아포간균1A751,도선출신매소항성차무정분매활성적중조균주.차균주용LB배양기재37℃、220 r/min요병배양과야,측득α-을선유산탈최매활력위15.6 U/mL,설명정합적α-을선유산탈최매기인능구재중조균주중은정전대화표체.본연구수차재고초아포간균중용정합형적방식중조표체료α-을선유산탈최매,제출료일충유잠력적생산α-을선유산탈최매적신방법.
