生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2010年
4期
23-26
,共4页
范英%钟成刚%闫淑珍%陈双林
範英%鐘成剛%閆淑珍%陳雙林
범영%종성강%염숙진%진쌍림
竹黄菌%DNA提取%RAPD%反应体系
竹黃菌%DNA提取%RAPD%反應體繫
죽황균%DNA제취%RAPD%반응체계
目的:建立随机引物扩增多态性DNA(RAPD)分子标记体系,为研究华东地区不同地理居群竹黄菌Shiraia bambusicola的遗传多样性奠定基础.方法:应用SDS法提取竹黄菌基因组DNA,并优化影响RAPD反应的条件因素.结果:竹黄RAPD的最佳反应体系为:25μl PCR反应体积,10×PCR缓冲液2.5μl.1.0U Taq酶,50ng模板DNA,2mmol/L Mg2+,0.2mmol/L dNTPs.0.4μmol/L随机引物.PCR循环程序为:94℃预变性4min,然后,94℃变性1min,38℃退火70s,72℃延伸90s,40次循环,最后72℃延伸6min,12℃保存.结论:建立了竹黄菌Shiraia bambusicola的最佳RAPD分子标记体系,可获得良好的竹黄菌RAPD指纹图谱.
目的:建立隨機引物擴增多態性DNA(RAPD)分子標記體繫,為研究華東地區不同地理居群竹黃菌Shiraia bambusicola的遺傳多樣性奠定基礎.方法:應用SDS法提取竹黃菌基因組DNA,併優化影響RAPD反應的條件因素.結果:竹黃RAPD的最佳反應體繫為:25μl PCR反應體積,10×PCR緩遲液2.5μl.1.0U Taq酶,50ng模闆DNA,2mmol/L Mg2+,0.2mmol/L dNTPs.0.4μmol/L隨機引物.PCR循環程序為:94℃預變性4min,然後,94℃變性1min,38℃退火70s,72℃延伸90s,40次循環,最後72℃延伸6min,12℃保存.結論:建立瞭竹黃菌Shiraia bambusicola的最佳RAPD分子標記體繫,可穫得良好的竹黃菌RAPD指紋圖譜.
목적:건립수궤인물확증다태성DNA(RAPD)분자표기체계,위연구화동지구불동지리거군죽황균Shiraia bambusicola적유전다양성전정기출.방법:응용SDS법제취죽황균기인조DNA,병우화영향RAPD반응적조건인소.결과:죽황RAPD적최가반응체계위:25μl PCR반응체적,10×PCR완충액2.5μl.1.0U Taq매,50ng모판DNA,2mmol/L Mg2+,0.2mmol/L dNTPs.0.4μmol/L수궤인물.PCR순배정서위:94℃예변성4min,연후,94℃변성1min,38℃퇴화70s,72℃연신90s,40차순배,최후72℃연신6min,12℃보존.결론:건립료죽황균Shiraia bambusicola적최가RAPD분자표기체계,가획득량호적죽황균RAPD지문도보.
