分析测试学报
分析測試學報
분석측시학보
JOURNAL OF INSTRUMENTAL ANALYSIS
2010年
6期
548-552
,共5页
陈家楠%潘运龙%丁晖%覃莉%蔡继业
陳傢楠%潘運龍%丁暉%覃莉%蔡繼業
진가남%반운룡%정휘%담리%채계업
近场光学显微镜%间充质干细胞%黏着斑
近場光學顯微鏡%間充質榦細胞%黏著斑
근장광학현미경%간충질간세포%점착반
将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移.应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical microscopy,NSOM)同时获取了VEGF诱导前后的MSCs的形貌和光学信息.结果表明,近场光学图观测到形貌图上所没有的黑色斑点,分析认为这些黑斑为细胞的黏着斑.近场光学图显示经过VEGF诱导后细胞的黏着斑数量明显增加.同时,对诱导前后干细胞的骨架蛋白进行免疫荧光标记并用共聚焦显微镜进行观察,结果表明细胞骨架由诱导前的无序状态转变为诱导后的有序状态,说明诱导后的干细胞处于迁移状态.光学超微结构图则显示了诱导后干细胞表面的光学细节比诱导前细胞大量增加,出现了大量直径约200 nm的光斑,这是由于细胞表面大量分泌黏附分子等蛋白分子引起的,这些结果为VEGF能够诱导MSCs进行定向迁移提供了实验依据和可视化证明.也表明NSOM不但能提供高分辨的光学分辨率,还可提供生物细胞精细结构的更深层次的光学信息.
將內皮細胞生長因子(VEGF)置于甲基纖維素碟中形成VEGF的濃度梯度分佈,併將人臍帶間充質榦細胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此濃度梯度中培養,觀察VEGF能否誘導MSCs定嚮遷移.應用近場掃描光學顯微術(Near-field scanning optical microscopy,NSOM)同時穫取瞭VEGF誘導前後的MSCs的形貌和光學信息.結果錶明,近場光學圖觀測到形貌圖上所沒有的黑色斑點,分析認為這些黑斑為細胞的黏著斑.近場光學圖顯示經過VEGF誘導後細胞的黏著斑數量明顯增加.同時,對誘導前後榦細胞的骨架蛋白進行免疫熒光標記併用共聚焦顯微鏡進行觀察,結果錶明細胞骨架由誘導前的無序狀態轉變為誘導後的有序狀態,說明誘導後的榦細胞處于遷移狀態.光學超微結構圖則顯示瞭誘導後榦細胞錶麵的光學細節比誘導前細胞大量增加,齣現瞭大量直徑約200 nm的光斑,這是由于細胞錶麵大量分泌黏附分子等蛋白分子引起的,這些結果為VEGF能夠誘導MSCs進行定嚮遷移提供瞭實驗依據和可視化證明.也錶明NSOM不但能提供高分辨的光學分辨率,還可提供生物細胞精細結構的更深層次的光學信息.
장내피세포생장인자(VEGF)치우갑기섬유소설중형성VEGF적농도제도분포,병장인제대간충질간세포(Mesenchymal stem cells,MSCs)우차농도제도중배양,관찰VEGF능부유도MSCs정향천이.응용근장소묘광학현미술(Near-field scanning optical microscopy,NSOM)동시획취료VEGF유도전후적MSCs적형모화광학신식.결과표명,근장광학도관측도형모도상소몰유적흑색반점,분석인위저사흑반위세포적점착반.근장광학도현시경과VEGF유도후세포적점착반수량명현증가.동시,대유도전후간세포적골가단백진행면역형광표기병용공취초현미경진행관찰,결과표명세포골가유유도전적무서상태전변위유도후적유서상태,설명유도후적간세포처우천이상태.광학초미결구도칙현시료유도후간세포표면적광학세절비유도전세포대량증가,출현료대량직경약200 nm적광반,저시유우세포표면대량분비점부분자등단백분자인기적,저사결과위VEGF능구유도MSCs진행정향천이제공료실험의거화가시화증명.야표명NSOM불단능제공고분변적광학분변솔,환가제공생물세포정세결구적경심층차적광학신식.