中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2010年
3期
36-38,46
,共4页
庞学敏%郭伟伟%李明义%黄保续
龐學敏%郭偉偉%李明義%黃保續
방학민%곽위위%리명의%황보속
禽流感病毒%H5N1亚型%HA基因%基因克隆%原核表达
禽流感病毒%H5N1亞型%HA基因%基因剋隆%原覈錶達
금류감병독%H5N1아형%HA기인%기인극륭%원핵표체
本研究根据Genbank中记录的禽流感H5N1亚型HA基因序列,设计了一对特异性引物,提取禽流感H5NI亚型病毒RNA,并利用一步法RT-PCR方法扩增HA部分基因,与pMD18-T载体连接克隆扩增并鉴定后提取质粒与32a质粒同时分别双酶切并进行连接克隆扩增,提取重组质粒后转入E.coli Rosetta细胞中进行原核表达,通过检测证明得到了可溶性表达,大小约为35kD左右.从而为进一步试验和研究打下了坚实的基础.
本研究根據Genbank中記錄的禽流感H5N1亞型HA基因序列,設計瞭一對特異性引物,提取禽流感H5NI亞型病毒RNA,併利用一步法RT-PCR方法擴增HA部分基因,與pMD18-T載體連接剋隆擴增併鑒定後提取質粒與32a質粒同時分彆雙酶切併進行連接剋隆擴增,提取重組質粒後轉入E.coli Rosetta細胞中進行原覈錶達,通過檢測證明得到瞭可溶性錶達,大小約為35kD左右.從而為進一步試驗和研究打下瞭堅實的基礎.
본연구근거Genbank중기록적금류감H5N1아형HA기인서렬,설계료일대특이성인물,제취금류감H5NI아형병독RNA,병이용일보법RT-PCR방법확증HA부분기인,여pMD18-T재체련접극륭확증병감정후제취질립여32a질립동시분별쌍매절병진행련접극륭확증,제취중조질립후전입E.coli Rosetta세포중진행원핵표체,통과검측증명득도료가용성표체,대소약위35kD좌우.종이위진일보시험화연구타하료견실적기출.
