延边大学农学学报
延邊大學農學學報
연변대학농학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE YANBIAN UNIVERSITY
2009年
3期
189-193
,共5页
周桐%金东淳%伊旭%武立丹
週桐%金東淳%伊旭%武立丹
주동%금동순%이욱%무립단
人参%DNA%RAPD-PCR条件
人參%DNA%RAPD-PCR條件
인삼%DNA%RAPD-PCR조건
探讨了人参基因组DNA提取方法及RAPD-PCR反应条件的优化.结果表明,用改良的CTAB方法提取的DNA均达到了RAPD-PCR分析的要求;优化的RAPD-PCR反应条件为:在25 μL RAPD-PCR反应体系中,模板DNA 20 ng,dNTP 200 μmol/L,MgCl2 1.5 mmol/L,10×Buffer 2.5 μL,引物浓度 0.4 μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0 U,其余以ddH2O定容至25 μL.PCR反应程序为:94 ℃预变性5 min;94 ℃ 45 s,40 ℃退火 1 min,72 ℃1 min,共40个循环;最后在72 ℃延伸5 min.
探討瞭人參基因組DNA提取方法及RAPD-PCR反應條件的優化.結果錶明,用改良的CTAB方法提取的DNA均達到瞭RAPD-PCR分析的要求;優化的RAPD-PCR反應條件為:在25 μL RAPD-PCR反應體繫中,模闆DNA 20 ng,dNTP 200 μmol/L,MgCl2 1.5 mmol/L,10×Buffer 2.5 μL,引物濃度 0.4 μmol/L,Taq DNA聚閤酶1.0 U,其餘以ddH2O定容至25 μL.PCR反應程序為:94 ℃預變性5 min;94 ℃ 45 s,40 ℃退火 1 min,72 ℃1 min,共40箇循環;最後在72 ℃延伸5 min.
탐토료인삼기인조DNA제취방법급RAPD-PCR반응조건적우화.결과표명,용개량적CTAB방법제취적DNA균체도료RAPD-PCR분석적요구;우화적RAPD-PCR반응조건위:재25 μL RAPD-PCR반응체계중,모판DNA 20 ng,dNTP 200 μmol/L,MgCl2 1.5 mmol/L,10×Buffer 2.5 μL,인물농도 0.4 μmol/L,Taq DNA취합매1.0 U,기여이ddH2O정용지25 μL.PCR반응정서위:94 ℃예변성5 min;94 ℃ 45 s,40 ℃퇴화 1 min,72 ℃1 min,공40개순배;최후재72 ℃연신5 min.
